Springen naar inhoud

Probe denaturatie (blotting)


  • Log in om te kunnen reageren

#1

R Dockx

    R Dockx


  • 0 - 25 berichten
  • 1 berichten
  • Gebruiker

Geplaatst op 08 november 2009 - 12:08

Hallo allemaal,
Dit is mijn eerste topic dus ik ben er niet erg vertrouwd mee :eusa_whistle:

Ik zit met een vraag: alvorens je een probe kan gebruiken (bij blotting), moet je hem enkelstrengig maken om te kunnen hybridiseren met ander DNA.

Nu: waarom moet de probe gedenatureerd worden via opkoken en niet d.m.v. alkali?
Ik dacht misschien omdat als men een alkalisch midden gebruikt dat de PH zorgt voor aspecifiek binden van de probe met het membraan gebonden DNA...

Weet iemand of dit juist kan zijn? Of is er een andere reden hiervoor?

Alvast bedankt

Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

Mrtn

    Mrtn


  • >1k berichten
  • 4220 berichten
  • VIP

Geplaatst op 09 november 2009 - 01:52

Als je de oplossing waar je probe in zit in zijn geheel alkalisch maakt, verander je de pH van de oplossingen voor je vervolgstappen ook. Dat is soms niet gewenst.

Overigens verwacht ik niet dat je veel membraan gebonden DNA tegen zult komen in de meeste stappen waar je zo'n probe voor gebruikt (zoals voor blotten). Over het algemeen zal je het membraan kwijt zijn tegen de tijd dat je probe erbij gaat.
Of course, the theory of relativity only works if you're going west.
-Calvin-





0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures