Ik moet de eiwitconcentratie van een monster bepalen aan de hand van de berekende molaire extinctiecoefficient van een standaard, het betreft cytochroom C (11700 Da). Nou denk ik dat ik al een redelijk eind op weg ben maar ik kom er toch niet meer uit... kan iemand zeggen waar ik de fout in ga?
extinctie standaard = 1.9446
extinctie onbekende = 1.3464
Berekening molaire extinctiecoefficient:
Concentratie cyt. c in std= 1mg / 11700 = 8.55e-5 mol/l
\(\epsilon = A : (cxl) = 1.9446 : (8.55e-5 x 1)= 33.75 mM-1 . cm-1 \)
de molaire extinctiecoefficient is dus 33.75 mM cm
___________________________________________________________________________
Berekening opbrengst
Volgens mij kan ik nu gewoon gebruik maken van de wet van Lambert en Beer?
\(c = A : (\epsilon x l) = 1.3464 : (33.75 x 1) = 0.04 mmol\)
\(0.04 x 11700 : 1000 = 0.47 mg /l = 0.00047 mg/ml\)
verdunningfactor gemeten monster was 6.66x = 0.0031 mg/ml in het onbekende monster.. Dat antwoord schijnt niet te kloppen, waarschijnlijk maaak ik ergens een 'domme' fout in eenheden..
alvast bedankt voor de hulp.
