Het aantal fragmenten na digestie met eco r1 en hind iii

Moderator: ArcherBarry

Reageer
Berichten: 3

Het aantal fragmenten na digestie met eco r1 en hind iii

Beste mensen,

Ik wil graag jullie hulp.

Hoe kan ik het aantal fragmenten bepalen na digestie van een plasmide bijv. pUC18 met Hind III of Eco RI?En,hoe bepaal ik dan de lengte van deze fragmenten?

Hartelijk bedankt!

Gebruikersavatar
Berichten: 4.220

Re: Het aantal fragmenten na digestie met eco r1 en hind iii

De NEB cutter tool werkt goed ](*,)
Of course, the theory of relativity only works if you're going west.

-Calvin-

Berichten: 25

Re: Het aantal fragmenten na digestie met eco r1 en hind iii

Allereerst moet je weten wat de herkenningssequentie is van de restrictieenzymen;

De herkenningssequentie voor HindIII is:

5’ AAGCTT 3’

3’ TTCGAA 5’

De herkenningssequentie voor EcoRI is:

5’ GAATTC 3’

3’ CTTAAG 5’

De volgende stap is kijken hoe vaak en waar deze specifieke sequentie terugkomt in puc18, zodoende kun je het aantal banden en grootte ervan achterhalen. Ik weet eerlijk gezegt niet hoe het met puc18 zit, maar vaak zitten een hoop herkenningssequenties in een kleine regio, de multiple cloning site. In dat geval zal je weinig banden vinden (één band van bijna de totale plasmide grootte)... De MCS zit vaak weer in een gen wat makkelijk te identificeren is, LacZ of resistentie-gen.

Reageer