Springen naar inhoud

Trichloorazijnzuur


  • Log in om te kunnen reageren

#1

DarkZehel

    DarkZehel


  • >25 berichten
  • 48 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 03 mei 2011 - 22:17

Ik kom niet uit de volgende vraag, het is een opdracht voor school:

Leg duidelijk uit dat je het trichloorazijnzuur bij de ijzerbepaling met een volumepipet moet toevoegen terwijl het een hulpstof is voor de onteiwitten.

Benodigdheden
  • Spectrofotometer
  • Plastic cuvetten
  • Plastic reageerbuizen
  • Plunjerpipet 1 mL (0,5 mL)
  • Volumepipet 1,5 mL en 3 mL (uitgezuurd)
  • Maatkolf van 100 mL
  • Maatcilinder van 100 mL
LET OP: Gebruik uitgezuurd glaswerk.
Glaswerk uitzuren met 1 mol.L-1 HCl, daarna goed spoelen met demiwater en apart bewaren.

Reagentia
Alle reagentia dienen minstens van pro-analyse kwaliteit te zijn en te worden opgelost in demiwater.
  • zoutzuur-reductiemiddel (voor omzetting Fe3+ in Fe2+)
    Bereid als volgt deze oplossing steeds vers:
    Los 1,60 g ascorbinezuur op in 100 mL 0,1 mol.L-1 zoutzuur.
    Deze oplossing steeds vers bereiden!
  • 0,6 mol.L-1 trichloorazijnzuur (ijzervrij)
  • kleurreagens
    Los 250 mg gesulfoneerd bathofenantroline (= 0,5 mmol) op in ca. 10 mL demiwater.
    Vul aan met een oplossing die 270 g natriumacetaat en 30 mL 1 mol.L-1 zoutzuur per liter bevat tot 500 mL.
Verwarm de oplossing tot 70 °C en filtreer na afkoelen.
  • ijzer(II) oplossing (geconcentreerd):
    2 mmol/L Fe(NH4)2 (SO4)2.6 H2O
    Per 100 mL wordt een druppel geconcentreerd H2SO4 toegevoegd.
  • standaardoplossing 30 µmol.L-1
    Bereid als volgt deze oplossing steeds vers:
    Verdun 1,5 mL van de 2 mmol.L-1 ijzer(II) oplossing tot 100 mL met demi-water.
    Deze oplossing dus steeds vers bereiden!



het zou erg fijn zijn, als iemand me kan helpen.
alvast bedankt,


greetz jimmy

Veranderd door Kravitz, 04 mei 2011 - 09:19
er liep iets fout met je opmaak, ik heb dit aangepast.


Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

Kravitz

    Kravitz


  • >1k berichten
  • 4042 berichten
  • Moderator

Geplaatst op 05 mei 2011 - 09:54

Iemand die hier een handje kan toesteken?
"Success is the ability to go from one failure to another with no loss of enthusiasm" - Winston Churchill

#3

Marko

    Marko


  • >5k berichten
  • 8935 berichten
  • VIP

Geplaatst op 05 mei 2011 - 11:11

Het zou helpen als de TS eens zou omschrijven waar de proef nou eigenlijk om draait en waar de diverse oplossingen voor worden gebruikt.

Cetero censeo Senseo non esse bibendum


#4

DarkZehel

    DarkZehel


  • >25 berichten
  • 48 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 05 mei 2011 - 12:04

De bedoeling was het ijzergehalte in bloedserum bepalen. (periode had met EPO te maken)
Het ijzer in dat bloed zit komt standaard voor als Fe3+ Het gehalte ijzer kan alleen bepaald worden door Fe2+

Zoutzuur-reductiemiddel zorgt ervoor daar dat de Fe3+ word omgezet naar Fe2+

Kleurreagens is om de kleur te aan het Fe2+ te geven.

Trichloorazijnzuur is voor het onteiwitten van het serum

Veranderd door DarkZehel, 05 mei 2011 - 12:05


#5

Marko

    Marko


  • >5k berichten
  • 8935 berichten
  • VIP

Geplaatst op 05 mei 2011 - 12:32

Ja, dat stond er al. Maar wat doe je nu feitelijk met al die oplossingen? Wat doe je waarbij, hoeveel van wat giet je waarin, etc.

Met andere woorden: Wat is de samenstelling van hetgeen je uiteindelijk in het meetapparaat stopt?

Cetero censeo Senseo non esse bibendum


#6

DarkZehel

    DarkZehel


  • >25 berichten
  • 48 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 05 mei 2011 - 13:40

Blanco (mL)
Demiwater: 1
Standaard: 0
(controle)monster: 0
Zoutzuur-reductiemiddel: 0,50
Meng en laat 15 minuten staan
Trichloorazijnzuur (mengend): 3
Buizen afdekken en 5 minuten hard centrifugeren
Centrifugaat: 3
Kleurreagens: 1,5

Standaard (mL)
Demiwater: 0
Standaard: 1
(controle)monster: 0
Zoutzuur-reductiemiddel: 0,50
Meng en laat 15 minuten staan
Trichloorazijnzuur (mengend): 3
Buizen afdekken en 5 minuten hard centrifugeren
Centrifugaat: 3
Kleurreagens: 1,5

Controlemonster/monster (mL)
Demiwater: 0
Standaard: 0
(controle)monster: 1
Zoutzuur-reductiemiddel: 0,50
Meng en laat 15 minuten staan
Trichloorazijnzuur (mengend): 3
Buizen afdekken en 5 minuten hard centrifugeren
Centrifugaat: 3
Kleurreagens: 1,5

Hoe voer je het uit:
1. Pipetteer in duplo in plastic reageerbuizen 1 mL serum. (Denk ook aan reagensblanco en standaard)
2. Voeg aan alle reageerbuizen 0,5 mL zoutzuur-reductiemiddel toe.
3. Meng en laat de buizen 15 min. bij kamertemperatuur staan.
4. Voeg vervolgens langzaam en onder voortdurend mengen aan alle buizen 3 mL trichloorazijnzuur toe.
5. Centrifugeer de afgedekte buizen 5 minuten scherp af.
6. Pipetteer 3,0 mL van het heldere centrifugaat in plastic buizen.
7. Voeg 1,5 mL kleurreagens toe.
8. Meng en bepaal de extinctie tegen demiwater bij een golflengte van 540 nm. Bereken m.b.v. de standaard het ijzergehalte.

Referentiewaarden: 10 - 30 µmol/L
Bepaal het ijzergehalte van twee serummonsters (2 patiėnten). Neem een controlemonster mee.


Het kostte even wat tijd, want alles stond in een net schema, maar kreeg het niet voor elkaar dat hier zo in te zetten, dus heb alles er maar zo netjes mogelijk ingezet ;)

greetz

Veranderd door DarkZehel, 05 mei 2011 - 13:41


#7

Marko

    Marko


  • >5k berichten
  • 8935 berichten
  • VIP

Geplaatst op 05 mei 2011 - 19:06

Het ziet er netjes uit, en duidelijk ook.
Het is dus de bedoeling om het trichloorazijnzuur aan het serum toe te voegen, vervolgens krijg je een neerslag dat je van de vloeistof scheidt door te centrifugeren.

De vloeistof waar je uiteindelijk aan gaat meten bestaat dus voor een deel uit serum en voor een deel uit trichloorazijnzuur. Wat zou nu het probleem zijn als je een onbekende hoeveelheid trichloorazijnzuur zou gebruiken?

Cetero censeo Senseo non esse bibendum


#8

DarkZehel

    DarkZehel


  • >25 berichten
  • 48 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 05 mei 2011 - 19:14

Als je te weinig doet, zit er nog eiwit in en meet je niet al het ijzer en als je er teveel in doet, heb je niet genoeg serum om te meten ?

Maar waarom dan specifiek met een volumepipet ? Want we hadden ook van de die pipetten staan met een pompen, wat veel nauwkeuriger is. Waarom die dan niet?

Het gaat niet om de hoeveelheid trichloorazijnzuur he, maar waarom met een volumetrisch pipet en niet met bijvoorbeeld een druppelpipet of een meetpipet ofso.

#9

Marko

    Marko


  • >5k berichten
  • 8935 berichten
  • VIP

Geplaatst op 05 mei 2011 - 19:34

Ik had het over onbekend, niet over te veel of te weinig. Dit is een probleem wat ook nog bestaat zelfs al zou je genoeg hebben toegevoegd. Wat is het probleem als het toegevoegde voume niet bekend is?

Cetero censeo Senseo non esse bibendum


#10

DarkZehel

    DarkZehel


  • >25 berichten
  • 48 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 05 mei 2011 - 19:39

Het enige andere wat ik kan bedenken is omdat anders de boel overloopt in het reageerbuisje ;) maar dat zal het vast niet zijn

Veranderd door DarkZehel, 05 mei 2011 - 19:40


#11

Marko

    Marko


  • >5k berichten
  • 8935 berichten
  • VIP

Geplaatst op 05 mei 2011 - 19:58

Wat wil je nu eigenlijk bereiken met het experiment?

Cetero censeo Senseo non esse bibendum


#12

DarkZehel

    DarkZehel


  • >25 berichten
  • 48 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 05 mei 2011 - 20:00

Het ijzergehalte bepalen in het bloed/serum van de patiėnten

#13

Marko

    Marko


  • >5k berichten
  • 8935 berichten
  • VIP

Geplaatst op 05 mei 2011 - 20:17

En wat is zo'n gehalte? In wat voor eenheden druk je dat bijvoorbeeld uit?
En hoe bepaal je dat gehalte met het experiment dat je uitvoert? Met andere woorden: Je meet iets, maar hoe haal je uit dat "iets" nu uiteindelijk het gehalte in het bloed?

Cetero censeo Senseo non esse bibendum


#14

DarkZehel

    DarkZehel


  • >25 berichten
  • 48 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 05 mei 2011 - 20:35

En wat is zo'n gehalte? Dat geeft aan hoeveel ijzer er in het bloed/serum zit.
In wat voor eenheden druk je dat bijvoorbeeld uit? milligram Fe 2+ per Liter
En hoe bepaal je dat gehalte met het experiment dat je uitvoert? Fotometrisch

Met andere woorden: Je meet iets, maar hoe haal je uit dat "iets" nu uiteindelijk het gehalte in het bloed?
Je meet de breking van het licht. D.m.v. de lichtbreking die ijzer in een oplossing geeft, kun je aflezen hoeveel zich in de oplossing bevind. Hoe meer ijzer, hoe hoger de lichtbreking

#15

Marko

    Marko


  • >5k berichten
  • 8935 berichten
  • VIP

Geplaatst op 05 mei 2011 - 20:45

Ik was misschien niet helemaal duidelijk met mijn laatste vraag. Laat ik het zo zeggen:

Je meet dus een bepaalde waarde op je apparaat. Die waarde komt overeen met een bepaalde hoeveelheid Fe2+ ionen per mL.

Maar hoe weet men dat die waarde overeenkomt met een bepaalde concentratie in het bloed? Welke stappen zijn daarvoor ondernomen?

Cetero censeo Senseo non esse bibendum






0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures