Wetenschapsforum

Hoi iedereen,

ik heb deze week een practicum moeten uitvoeren en daarbij de kinase-activiteit moeten moeten meten in verschillende stalen van gist met gemuteerde vormen van hexokinasen 1, hexokinase 2 en glucokinase.

Dit gebeurde door de hoeveelheid NAPDH te meten in de pentosofosfaatweg waarbij door toevoeging van deze 3 kinase glucose wordt omgezet in G-6-P en dan door G-6-P-DH werd omgezet in 6-fosfoglucone-delta-lacton en ook NAPDH werd geproduceerd.

Nu bleek dat er in het extract met de 3 gemuteerde, niet actieve vormen er toch kinase-activiteit was.

Er zouden hier 3 mogelijke antwoorden op zijn. Ik dacht dat er misschien nog andere kinasen in het staal aanwezig en ook dat de reactie gewoon gebeurt zonder dat er enzymen aanwezig zijn omdat deze immers alleen de reactie versnellen.

Zouden jullie me kunnen helpen bij het vinden van de derde reden? ik heb al ergens gelezen dat er in gistcellen een 2de bron van NAPDH is, de isocitraatcylus dacht ik, zou dit kunnen kloppen?

Met vriendelijke groetjes

Florence