Ik en mijn maat moeten een verslag schrijven over een practicum van biochemie en we kunnen een vraagje niet beantwoorden
Waarom is het belangrijk een eiwitoplossing verkregen na een ammoniumprecipitatie te dialyseren om vervolgens een anionuitwisseling uit te voeren?
Laatste berichten
-
08:29
Programmeren met vectoren 5
-
23:12
speciale rel. theorie 10
-
22:57
Straatklok loopt 5 minuten voor 11
-
22:57
wig 6
-
22:36
Gravity and gravitation 4
-
22:24
[scheikunde] vraag Chemie - wat is de oplossing? 10
-
19:47
Bruine vlekken op treinaanwijzerbord 10
-
19:44
Vogels in de stad zijn goede klussers 2
-
19:12
Rood laserlicht 3
-
17:30
Herleiden afmetingen vanaf een foto 21
-
16:34
[wiskunde] Prijs Product per KG; Alternatief Inzicht 3
-
13:57
do-re-mi-fa-so vliegtuigen 9
-
13:16
geen minkowski-ruimte toch? Doe ik dit nou fout? 17
-
13:12
[natuurkunde] kroon van koning op Syracuse 10
-
25 apr
2013 – Augustus Vraag 3 3
-
24 apr
Vraag 2009 Juli Vraag 5 5
-
24 apr
positie 2
-
24 apr
Schroefdraad berekening 8
-
24 apr
[scheikunde] Kan chloorgas de geleiding van elektriciteit belemmeren? 9
-
23 apr
Weerfrustratie 9
Nieuwsberichten
-
04 mar
Een nieuw soort magnetisme: altermagnetisme
-
31 okt
AI kan via stem diabetes vaststellen 11
-
21 okt
Einstein krijgt wéér gelijk 45
-
07 feb
witter dan wit 20
-
19 jun
irrigatie en de aardas
Ammoniumsulfaatprecipitatie
Moderator: ArcherBarry
-
- Berichten: 6.853
Re: Ammoniumsulfaatprecipitatie
Geef eens iets meer context. Waarom heb je die eiwitoplossing gemaakt?
-
- Berichten: 98
Re: Ammoniumsulfaatprecipitatie
Wel wat we gedaan hebben is het opzuiveren van het GFP-eiwit uit een E.coli bacterie. We hebben de cellen opengebroken en dan door anionuitwisselingschromatografie het GFP eiwit gescheiden van de endogene eiwitten. Daarvoor hebben we een sepharose Q kolom gebruikt waarbij de matrix bestond uit quaternaire ammoniumionen. Het gebruikte eluens had een pH = 8 en had een in de tijd toenemende NaCl concentratie. Daarna hebben we de goede fractie eruit gehaald door de fracties te bekijken onder UV licht
-
- Berichten: 6.853
Re: Ammoniumsulfaatprecipitatie
Ik hoop dat een biochemicus je antwoord kan geven, maar ik kan een vraag stellen: kom je op deze manier af van het zout, zodat je het GFP daarna als label kunt gebruiken zonder meteen andere eiwitten te denatureren?
-
- Berichten: 2.330
Re: Ammoniumsulfaatprecipitatie
Om er voor te zorgen dta je je eiwit zo zuiver mogelijk krijgt zonder dat je eiwit last krijgt van een pH wisseling. pH wisseling heeft invloed op de eiwit samenstelling. Daarom doe je een dialyse om de schadelijke effecten van de zouten en pH niveau er uit te krijgen. Voor het verder opwerken van het eiwit is het ook belangrijk om zo min mogelijk bij effecten te hebben.Waarom is het belangrijk een eiwitoplossing verkregen na een ammoniumprecipitatie te dialyseren om vervolgens een anionuitwisseling uit te voeren?
Ik dialyseer vaak PBS oplossing dat werkt wel goed.
MVG Ron
