Springen naar inhoud

Inverse PCR


  • Log in om te kunnen reageren

#1

wozzels

    wozzels


  • 0 - 25 berichten
  • 5 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 10 augustus 2005 - 14:05

Kan iemand me helpen uit te leggen hoe 'inverse PCR' werkt?
Werk je dan ook gewoon met een forward en backward primer of hoe zit het juist?

Mvg

Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

DanD_CF

    DanD_CF


  • 0 - 25 berichten
  • 9 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 10 augustus 2005 - 17:28

Bij inverse PCR gaat men een onbekende sequentie amplificeren. Deze onbekende sequentie is hierbij gelegen naast een gekende sequentie.

Om dit te bekomen, werkt men ook met primers, maar deze worden in omgekeerde (inverse) richting aangebracht op de gekende sequentie (zie afbeelding). Vervolgens worden de uiteinden van de gekende sequentie en de onbekende sequentie gedigereerd met een restrictie enzym (zie restrictie A) om ze vervolgens te kunnen ligeren zodat we circulair DNA verkrijgen. Dit circulair DNA wordt vervolgens terug geknipt (zie restrictie B), zodat de primers in goede richting georiŽnteerd zijn om amplificatie toe te laten van de onbekende sequentie.

Afbeelding Inverse





0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures