standaard addtie berekening
Moderator: ArcherBarry
-
- Berichten: 50
standaard addtie berekening
Van een standaardaddtie bepaling op de HPLC heb ik de volgende vergelijking verkregen.
y=35452x+3000000
y is het piekoppervlak in μvolt.seconden
x is de concentratie stof in μg/ml
Injectievolume = 20 μl
massa monster = 120,2 mg opgelost in 50,00 ml.
reeks
c standaard (μg/ml): 0, 20, 40, 100
Vmonster = 5,00 ml
Vstandaard = 5,00ml
Vtotaal= 10,00 ml
Ik wil weten wat de massafractie (mg/mg) stof in het monster is.
De massafractie moet tussen de 0,016 - 0,068 mg/mg liggen.
Zelf kom ik kom uit op een massafractie van 0,1408 mg/mg.
Ik weet niet waar mijn fout ligt. Kan iemand mij helpen?
y=35452x+3000000
y is het piekoppervlak in μvolt.seconden
x is de concentratie stof in μg/ml
Injectievolume = 20 μl
massa monster = 120,2 mg opgelost in 50,00 ml.
reeks
c standaard (μg/ml): 0, 20, 40, 100
Vmonster = 5,00 ml
Vstandaard = 5,00ml
Vtotaal= 10,00 ml
Ik wil weten wat de massafractie (mg/mg) stof in het monster is.
De massafractie moet tussen de 0,016 - 0,068 mg/mg liggen.
Zelf kom ik kom uit op een massafractie van 0,1408 mg/mg.
Ik weet niet waar mijn fout ligt. Kan iemand mij helpen?
-
- Berichten: 7
Re: standaard addtie berekening
ik zit dus precies met hetzelfde probleem ..
wij moesten cafeine gehalt in cola bepalen, met behulp van de HPLC, en standaard additie
we hebben eerst het monster voor bewerkt met een SPE kolom om eventuele verontreiniging weg te halen en de caffeine te concentreren
vervolgens hebben we 2 monsters ingespoten
- cola-monster 1 ml
- cola + caffeine :(aditie) (0,5 +0,5 ml= 1ml)
de concentratie van de caffeine is bekend. Peak area's zijn ook bekend
Hoe moeten we nu de berekening uitvoeren?
wij moesten cafeine gehalt in cola bepalen, met behulp van de HPLC, en standaard additie
we hebben eerst het monster voor bewerkt met een SPE kolom om eventuele verontreiniging weg te halen en de caffeine te concentreren
vervolgens hebben we 2 monsters ingespoten
- cola-monster 1 ml
- cola + caffeine :(aditie) (0,5 +0,5 ml= 1ml)
de concentratie van de caffeine is bekend. Peak area's zijn ook bekend
Hoe moeten we nu de berekening uitvoeren?
-
- Berichten: 677
Re: standaard addtie berekening
In het laatste geval is dat niet zo moeilijk.
Chromatogram 1:
piekopp = A, conc onbekende = x
Chromatogram 2:
piekopp = B, conc onbekende = x + s
met "s" de toegevoegde hoeveelheid standaard
Het verschil in piekgrootten van beide chromatogrammen is evenredig met de hoeveelheid van de onbekende s:
Piekopp B - A, conc onbekende = s
Dus: responsfactor voor onbekende =
B-A
-----
s
Piekopp A correspondeert dus met conc onbekende x
s*A
----- = x
B-A
Chromatogram 1:
piekopp = A, conc onbekende = x
Chromatogram 2:
piekopp = B, conc onbekende = x + s
met "s" de toegevoegde hoeveelheid standaard
Het verschil in piekgrootten van beide chromatogrammen is evenredig met de hoeveelheid van de onbekende s:
Piekopp B - A, conc onbekende = s
Dus: responsfactor voor onbekende =
B-A
-----
s
Piekopp A correspondeert dus met conc onbekende x
s*A
----- = x
B-A