Springen naar inhoud

isolatie DNA uit bloed


  • Log in om te kunnen reageren

#1

seth_CF

    seth_CF


  • >25 berichten
  • 62 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 22 december 2005 - 16:19

hallo,

we hebben net een isolatie van chromosomaal DNA uit bloed uitgevoerd.

Maar wat ik niet begrijp is dat men de concentratie van het DNA moet bepalen met een factor:

Extinctie bij 260 nm moet vermenigbuldigd worden met factor 3,8.
Zo krijgt men de [DNA] in g/L.

Weet iemand hoe men aan die 3,8 komt??

bedankt!!!

Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

Roy van Heesbeen

    Roy van Heesbeen


  • >250 berichten
  • 740 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 22 december 2005 - 17:07

vreemd ja, ik heb een heel ander getal bebruikt voor de kwantiteit meting, ik weet alleen niet meer precies welk getal dit was...

#3

biochemiefreak

    biochemiefreak


  • >1k berichten
  • 2330 berichten
  • VIP

Geplaatst op 22 december 2005 - 18:04

Ik heb echt geen idee. Ik gebruikte altijd een nanodrop en die software rekende het voor mij uit.

MvG Ron

#4

Napoleon1981

    Napoleon1981


  • >1k berichten
  • 2399 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 22 december 2005 - 18:35

Vind dat niet zijn oorsprong in de extinctie coefficent en wat verdunningen?

#5

Roy van Heesbeen

    Roy van Heesbeen


  • >250 berichten
  • 740 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 22 december 2005 - 23:40

de factor kan natuurlijk ook voor alleen bloed zijn, voor mijn sequentie analyse heb ik andere getallen, maar die gebruik ik eigelijk nooit omdat de kwantiteit vrijwel altijd bekend is.

#6

biochemiefreak

    biochemiefreak


  • >1k berichten
  • 2330 berichten
  • VIP

Geplaatst op 23 december 2005 - 11:12

Ligt er maar net aan wat je doelstellingen zijn. Wil je deze waarden zeer nauwkeurig hebben voor de gen expressie bepalen van bepaalde cellen (endotheel, monocyten, etc) dan is de kwantitatieve bepaling van het DNA/RNA matieraal wel belangrijk.

Bloed is trouwens wel een heel ruim begrip. In rode bloedcellen zit geen kern dus richt je je op de leukocyten en deze zou je er nog uit kunnen halen en scheiden van het serum.

MvG Ron

#7

bteunissen

    bteunissen


  • >1k berichten
  • 1122 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 23 december 2005 - 15:29

het komt er op neer dat je moet wten wat je doet! niet zo maar vermenigvuldigen met factoren in de hoop dat er een juiste waarde uit komt. Volgende keer heb je andere meetomstandigheden, vermenigvuldig je weer met 3,8 en wie zegt je dat je dan de juiste waarden hebt berekend? :eusa_sick:

Grtz Bas

#8

Napoleon1981

    Napoleon1981


  • >1k berichten
  • 2399 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 23 december 2005 - 23:09

Juist, dus de vraagsteller moet het heleprotocol posten voor wij wat hier over kunnen zeggen. Zoals ik al zeg het heeft gewoon te maken met verdunningen en extinctiecoefficient. In die factor is alles gewoon al uitvermenigvuldigd en daarom hoeft het alleen nog maar met de extinctie coefficient vermenigvuldigd te worden om zo de waarde te verkrijgen.





0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures