Springen naar inhoud

PCR-klonering


  • Log in om te kunnen reageren

#1

stef.

    stef.


  • >100 berichten
  • 152 berichten
  • Gebruiker

Geplaatst op 07 januari 2006 - 19:23

Hallo iedereen!
Is er soms iemand die weet wanneer we eigenlijk gebruik maken van een PCR-reactie en wanneer we iets gaan klonen (of kloneren zoals onze prof altijd zegt...!)? In beide gevallen vermenigvuldig je toch een bepaald gebied uit het DNA van een bepaald organisme. Ik weet wel dat PCR altijd in vitro is (ik dacht dat dit was omdat bijvoorbeeld een bacterie niet overleeft bij die temperatuursverschillen tijdens PCR) en dat klonen in vivo is (door invoeging van plasmiden/bacteriofagen/cosmiden in een bacterie), maar ik weet niet wanneer je wat gebruikt. Amplificatie via PCR lijkt me trouwens ook veel handiger (of is mijn intuiŽtie hier verkeerd?).
Ik hoop dat iemand me kan helpen!
Alvast bedankt!

Stef.

Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

Gideon

    Gideon


  • Chemiefoum.nl erelid
  • 337 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 08 januari 2006 - 08:37

Kloneren is de algemene term voor het maken van insert (bijv met PCR) en een klonerings of expressieconstruct en het maken van een GGO. Klonen slaat in dit geval op een geheel organisme dupliceren (een wel/niet getransformeerde bacterie op een petrischaalbodem noem je een kloon).

Het nadeel van PCR is dat er veel meer fouten worden gemaakt bij de amplificatie, het is veel beter om een plasmide bijv. in vivo te kopieeren. Je krijgt met PCR namelijk geen mooie hele plasmiden, maar een lineaire herhalende sequentie (uh...) van het plasmied. Het polymerase blijft er namelijk rondjes op 'rennen'. Daarnaast is er een veel betere foutcontrole (en worden er dus minder mutaties geintroduceerd) en is het bovendien goedkoop om grote hoeveelheden te krijgen. Het isoleren is ook een eitje (je gebruikt gewoon een mini/maxiprep).

#3

stef.

    stef.


  • >100 berichten
  • 152 berichten
  • Gebruiker

Geplaatst op 09 januari 2006 - 11:16

Slaan de woorden klonen en kloneren dan niet op hetzelfde?

Stef.

#4

Gideon

    Gideon


  • Chemiefoum.nl erelid
  • 337 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 09 januari 2006 - 12:42

Nee. Klonen is dus het maken van een exacte kopie. Kloneren is een technische term die gebruikt wordt voor het maken van genetisch gemodificeerd organisme.

#5

stef.

    stef.


  • >100 berichten
  • 152 berichten
  • Gebruiker

Geplaatst op 09 januari 2006 - 23:42

Ooooh fijn, weer iets bijgeleerd vandaag!
Bedankt!

Stef.

#6

Reteip

    Reteip


  • 0 - 25 berichten
  • 11 berichten
  • Gebruiker

Geplaatst op 06 februari 2006 - 12:08

Ik moet binnenkort een profiel werkstuk presenteren en het hele verhaal van de PCR reactie etc. is een ingewikkeld voor de leken. De bedoel is dat het zo gepresenteerd word dat ook de alfa-mensen het kunnen begrijpen. Het werkstuk gaat trouwens over DNA-profiling, waarbij gebruik gemaakt word van de PCR reactie met primer mengsel op STR's en er vervolgens een meting aan de concentraties verricht word. Nu komt de vraag, weten jullie ook nog ergens goede animaties van: primer-anealing, PCR en DNA-isolatie te vinden? Het maakt het altijd een stuk tastbaarder dan een droog verhaal.. Alvast bedankt!

Laters, Snowie





0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures