Springen naar inhoud

Te hoge 260/280 ratio


  • Log in om te kunnen reageren

#1

Astridje85_CF

    Astridje85_CF


  • >25 berichten
  • 67 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 07 februari 2006 - 13:28

Volgens de site van Roche kunnen er 2 redenen voor zijn;
1. je monster is besmet met DNA
2. je DNA is 'gesheared'

Maar ik kan nergens op de site vinden, hoe je het verschil tussen deze 2 ziet; als je DNA met RNA besmet is, zie je een extra bandje op je gel, maar ook als je DNA 'gesheared' is zie je dit bandje eveneens (in mijn geval dan!).

Weet iemand hier toevallig een oplossing voor?

Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

Gideon

    Gideon


  • Chemiefoum.nl erelid
  • 337 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 07 februari 2006 - 14:11

Je waarde moet ca. rond de 2 liggen (dit is dus zuiver RNA/DNA) maar kan gerust wat hoger zijn. Wanneer je last hebt van eiwitcontaminatie wordt je ratio juist lager. Met deze meting meet je trouwens RNA+DNA (260nm) en eiwit (280), het onderscheid tussen beide is met een spectrofotometer niet te maken.

Gesheared DNA doe je niets aan, het is net een kluwen wol die je niet zomaar weer mooi opgerold krijgt, ben bang dat je opnieuw moet isoleren (vermijd vortexen!)

Veranderd door Gideon, 07 februari 2006 - 14:13


#3

biochemiefreak

    biochemiefreak


  • >1k berichten
  • 2330 berichten
  • VIP

Geplaatst op 07 februari 2006 - 16:54

Vooral een te hoge 280 is irritant. Te veel eiwit in je monster. Het DNA kun je er uit halen door een voorbewerkingsstap met DNase uit tevoeren. :)
Met die 2 waarde voor de 260 ben ik helemaal eens :P

MvG Ron





0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures