Springen naar inhoud

Retentietijden RP-HPLC


  • Log in om te kunnen reageren

#1

poeder

    poeder


  • >25 berichten
  • 36 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 07 april 2006 - 11:15

Waar kan het aan liggen wanneer de retentietijd van een piek in het monster niet precies overeenkomt met de retentietijd van de zuivere component? Afwijking is 1 a 2 minuten. Dit terwijl ggen verandering van eluens samenstelling en flow is geweest. Of de temperatuur veranderd is weet ik niet omdat het niet meetbaar is

Veranderd door poeder, 07 april 2006 - 11:16


Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

The Herminator

    The Herminator


  • >1k berichten
  • 2035 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 07 april 2006 - 11:28

Kan het zijn dat je monster als geheel de retentie van die ene component, bijv. door moleculaire interacties tussen die component en 1 of meerdere andere componenten van het monster, verandert?

edit: dikke vingers ;)

Veranderd door The Herminator, 07 april 2006 - 11:29


#3

bteunissen

    bteunissen


  • >1k berichten
  • 1122 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 07 april 2006 - 11:35

De matrix van je monster is idd erg belangrijk. Als je matrix van je monster bijvoorbeeld veel meer of minder organisch oplosmiddel bevat dan je standaard dan heb je al problemen.
Vertel eens meer: wat voor componenten analyseer je en wat is de matrix van je monster en je standaard?

Grtz
Bas

edit: dunne vingers ;)

#4

JeroenCV

    JeroenCV


  • >1k berichten
  • 1153 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 07 april 2006 - 12:29

Hoe heb je geinjecteerd (handmatig/autosampler)? wat voor een systeem werk je? wat zijn de parameters? Om welke stof gaat het? uit welk matrix?

#5

poeder

    poeder


  • >25 berichten
  • 36 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 07 april 2006 - 14:46

Het gaat om rutine in methanol wortel extract. Naast rutine zitten nog andere onbekende polaire stoffen in het extract.
Zuivere stof opgelost in methanol.

Geplaatste afbeelding


Handmatige injectie.

isocratisch systeem, mengsel van eluens zelf bereid.

kolom: C18

#6

Napoleon1981

    Napoleon1981


  • >1k berichten
  • 2399 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 07 april 2006 - 14:57

Methanol als oplosmiddel voor het monster en een c18 kolom gaat niet samen. Verdun de methanol concentratie tot onder de concentratie van methanol in de mobiele fase, dan zit je goed. Hoe ziet je piek vorm er uit? breed?

#7

poeder

    poeder


  • >25 berichten
  • 36 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 15 mei 2006 - 07:53

Het probleem is dat de zuivere stof alleen in methanol oplosbaar is. Het monster ook. Trouwens hoe moet je de methanol concentratie verdunnen tot onder de methanol concentratie van de mob. fase?

De piek ziet op het oog goed uit.

Bij sommige injecties treedt er staatvorming van de piek op.

#8

bteunissen

    bteunissen


  • >1k berichten
  • 1122 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 15 mei 2006 - 09:08

Normaal gesproken los je je monster op in een matrix die nagenoeg gelijk is aan je mobiele fase. Dit lukt echter niet altijd. Zoals bijvoorbeeld in jouw geval waar je monster niet goed oplost.
Je zou naar mijn mening je monster op kunnen lossen in methanol (zo´n laag mogelijk % MeOH natuurlijk). Verdunnen kun je simpelweg doen met water.
Als je MeOH% van je monster hoger is dan je eluens probeer dan een zo´n klein mogelijk plug te injecteren. Hoe kleiner je injectievolume hoe sneller je monster in-line verdund en hoe minder problemen je ondervindt met je scheiding. In-line verdunnen gaat relatief snel en daardoor heb je ook geen/weinig problemen met je MeOH in je monster. Logischer wijze gaat die verdunning natuurlijk het snelst als je injectievolume klein is.

Bas





0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures