ik heb het forum afgezocht en menige internet-sites , maar ik vind dus niets over het volgende :
Ter info :
Ik ben namelijk bezig met de bepaling van caseïne in melk. Ik heb dit reeds bepaalt via een ELISA methode , maar ik wil meer zekerheid. Vervolgens heb ik dus de Kjeldahl-procedure uitgevoerd. Zo wordt het totale N-gehalte en het niet-caseïne N-gehalte bepaald. Het verschil van beide geeft het gehalte aan caseïne. Het probleem is dat ik 3,1% caseïne vind met de kjeldahl-methode en 1,8% met de ELISA-procedure. Het resulaat dat ik zou moeten vinden, zal uiteindelijk dienen als referentiemateriaal om een LOD te bepalen van een ELISA-methode voor caseïne. Validatie dus. Je kan dit referentiemateriaal ook kopen maar het budget is beperkt. Ik ben nu op zoek naar mogelijke fouten tijdens de analyse en andere fouten die erin zijn geslopen.
Waarschijnlijk is de bepaling van de niet-caseïne N onjuist verlopen.
Mijn vraagjes :
-Ik heb azijnzuur 10m% en natriumacetaat 1N gebruikt om precipitatie van caseïne en vetten te krijgen. Andere filters hebbek reeds geprobeerd. Misschien beter andere concentraties gebruiken? Moet ik ergens rekening houden met een verdunningsfactor : ik pippetteer 10ml melk , behandel ze tot een eindvolume van 100ml. Nadien filtreren die handel en vervolgens 50ml filtraat uitdampen op de destructieblok.Alsek dan VF 10 in rekening breng kan het wel kloppen. De destillatie en titratie verlopen automatisch , dus daar kan er normaal niets fout gaan, ik gebruik ook overmaat titrant (75ml)
- Weet iemand of er nog ergens iets kan mislopen ? De destructie zelf gebeurt bij 430°C, het uitdampen geleidelijk aan ( manuele T-verhoging van 20°C )
- Ik zou exact willen weten welke kooktemperaturen water en zwavelzuur hebben tijdens het uitdampen. Ik heb dus eigenlijk een FASEDIAGRAM nodig van het mengsel maar ik vindt dit niet direct.
Dank bij voorbaat , alleen al om dit allemaal te lezen
