Springen naar inhoud

PCR


  • Log in om te kunnen reageren

#1

seth_CF

    seth_CF


  • >25 berichten
  • 62 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 17 mei 2006 - 12:53

Weet iemand waarom men bij een PCR-buffer natriumfosfaat, NaCl, EDTA, glycerol en DTT toevoegd?

oprechte dank!!


s

Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

Roy van Heesbeen

    Roy van Heesbeen


  • >250 berichten
  • 740 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 18 mei 2006 - 21:43

De buffer bij PCR heeft een aantal doelen zoals het bevoorderen van primer annealing enz.

Meestal wordt er een Tris-HCl buffer gebruikt en er wordt extra KCl aantoegevoegd. (KCl is beter als NaCl doordat KCl ook in de natuurlijke omgeving van het DNA, dus in de cellen zit). Wat DTT doet weet ik niet, maar ik denk dat dit net als DMSO zorgt voor een betere en sterkere primer annealing.

EDTA wordt maar in kleine hoeveelheden toegevoegd. Dit vangt naast de schadelijke metaalionen ook de Mg ionen weg, deze zijn echter essentieel voor het polymerase en moeten dus soms extra worden toegevoegd!





0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures