Springen naar inhoud

volgorde verbindingen bij HPLC


  • Log in om te kunnen reageren

#1

feather23

    feather23


  • 0 - 25 berichten
  • 4 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 19 juni 2006 - 18:03

Ik heb een vraag. Ik heb een droog extract van echinacea gecheiden met behulp van RP-HPLC. Ik vroeg me af waarom eerst het chlorogeenzuur, dan het echinacoside en vervolgens het cichorinezuur wordt geŽlueerd. Ik dacht dat de meest polaire verbinding eerst kwam: echinacoside heeft 2 suikermolecules in zijn structuur, dus is dan toch het meest polair, niet?

Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

Jeffrey_Buter

    Jeffrey_Buter


  • >250 berichten
  • 857 berichten
  • Gebruiker

Geplaatst op 19 juni 2006 - 18:50

Ik ken de stoffen wie je gescheiden hebt niet maar inderdaad hoort het meest polaire molecuul eraf te komen. Je mobiele fase is immers polair.
Maar heeft echinacoside niet een structuur waarbij interne waterstofbruggen gevormd worden waardoor de polariteit afneemt? Zoals gezegt ken ik de structuur van het molecuul niet maar dit is het enige wat ik bedenken na jou uitleg van de proef.

#3

feather23

    feather23


  • 0 - 25 berichten
  • 4 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 20 juni 2006 - 05:53

Zou het soms kunnen dat de polariteit wordt beÔnvloed door de symmetrie van een molecule, omdat cichorinezuur een perfect symmetrische molecule is en laatst komt.

#4

Napoleon1981

    Napoleon1981


  • >1k berichten
  • 2399 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 20 juni 2006 - 07:34

wat was de pH van de mobielefase?

#5

feather23

    feather23


  • 0 - 25 berichten
  • 4 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 20 juni 2006 - 08:08

De pH was 2 (water met fosforzuur)

#6

The Herminator

    The Herminator


  • >1k berichten
  • 2035 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 20 juni 2006 - 08:33

cLogP waardes voor deze 3 verbindingen:

Echinacoside: -2.92
Chlorogeenzuur: 0.74
Cichorinezuur: 0.58

Echinacoside zou dus ruim het eerste van de kolom af moeten komen, vervolgens Cichorinezuur en als laatste Chlorogeenzuur (al ontlopen die laatste twee elkaar weinig!).....

Echinacoside is zoveel meer polair dan de andere twee dat interne waterstofbrug-vorming hier geen rol kan spelen! 8-)

Er is dus iets vreemds aan de hand.... reageert er niet iets met je fosforzuur?

#7

Napoleon1981

    Napoleon1981


  • >1k berichten
  • 2399 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 20 juni 2006 - 08:54

Nog maar een vraag, wat was de kolom en de grote van de porien? Kan iemand de pKa van die carbonzuren geven, er zit teveel in de buurt voor mij om een nauwkeurige schatting te maken? Ik heb nu geen chemdraw bij de hand 8-)

Zeker die van chlorogeenzuur is interessant denk ik

Veranderd door Napoleon1981, 20 juni 2006 - 09:20


#8

feather23

    feather23


  • 0 - 25 berichten
  • 4 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 20 juni 2006 - 09:57

kolom: Licrospher RP-18e (5 Ķm), lengte 250.00 mm, interne diameter 4.00 mm

Met die pKa kan ik je niet helpen. Ben daar niet zo in thuis 8-)

#9

The Herminator

    The Herminator


  • >1k berichten
  • 2035 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 20 juni 2006 - 10:08

Nog maar een vraag, wat was de kolom en de grote van de porien? Kan iemand de pKa van die carbonzuren geven, er zit teveel in de buurt voor mij om een nauwkeurige schatting te maken? Ik heb nu geen chemdraw bij de hand 8-)

Zeker die van chlorogeenzuur is interessant denk ik

Mijn software geeft:

Echinacoside: 13.1 en 15.0
Chlorogeenzuur: 3.4, 9.5 en 12.1
Cichorinezuur: 5.1 en 9.5

Structuren:

Geplaatste afbeelding

Succes Napoleon! :)

#10

Napoleon1981

    Napoleon1981


  • >1k berichten
  • 2399 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 20 juni 2006 - 10:30

Thanx herminator.

De pKa van die carboxyphenol in Chlorogeenzuur is 3.4. De pH van de mobiele fase is 2. Ik weet niet hoe nauwkeurig die pH is vastgesteld, maar nu en zeker als hij iets hoger is dan is de carboxyphenol deels gedeprotoneerd en dus geladen. Dit is het enige molecuul dat dit kan, gezien de grote van het molecuul heeft dit een significante invloed op de retentie en zou het mij niet verbazen als deze dus inderdaad eerder elueert.

Veranderd door Napoleon1981, 20 juni 2006 - 11:07






0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures