Elutiebuffer
Moderator: ArcherBarry
- Berichten: 2.330
Re: Elutiebuffer
De elutie buffer zorgt ervoor dat je DNA/RNA van de kolom af komt. De hoeveelheid elutie buffer heeft dus invloed op je concentratie DNA/RNA.
Het DNA/RNA lost op in de elutiebuffer waardoor het door de kolom heen kan.
MvG Ron
Het DNA/RNA lost op in de elutiebuffer waardoor het door de kolom heen kan.
MvG Ron
-
- Berichten: 740
Re: Elutiebuffer
Toevoeging: meestal ga je van een hoge zout concentratie naar een lage.
Bij een hoge concentratie bindt je DNA sterk aan de kolom. Bij een lage zout concentratie (van de elutie buffer) verzwakt de binding en komt het DNA los van je kollom. Elutie buffer bestaat meestal uit een Tris EDTA buffer.
Bij een hoge concentratie bindt je DNA sterk aan de kolom. Bij een lage zout concentratie (van de elutie buffer) verzwakt de binding en komt het DNA los van je kollom. Elutie buffer bestaat meestal uit een Tris EDTA buffer.
-
- Berichten: 704
Re: Elutiebuffer
hoeft niet specifiek voor DNA/RNA te zijn. Kan ook bijvoorbeeld bij een affiniteitschromatografie voor een eiwit dat bindt aan een gecoat antilichaam in de kolom.
- Berichten: 2.330
Re: Elutiebuffer
ik ging er vanuit dat het voor DNA/RNA werk is, aangezien hij geplaatst is in de DNA/RNA box.
Elutie buffer kan inderdaad goed bij affiniteitschromatografie en FPLC.
MvG Ron
Elutie buffer kan inderdaad goed bij affiniteitschromatografie en FPLC.
MvG Ron
-
- Berichten: 2.399
Re: Elutiebuffer
Elutie buffer kan overal waar chromatografie bedreven wordt. RP, SCX, Fluoro chromatografie en noem ze allemaal maar op. Elutie buffer is gewoon een vloeistofje dat al het gebonden materiaal van de kolom haalt.
-
- Berichten: 1.153
Re: Elutiebuffer
Aanvulling.
Om te zorgen dat je stof loslaat van je sobens (=kolommateriaal) kan je verschillende dingen veranderen.
De belangrijkste zijn:
pH: door een andere pH laat je stof los van je sorbens
ionsterkte: door andere zout concentratie laat je stof los van je sorbens
% organisch modifier: door andere % organisch modifier laat je stof los van je sorbens (dit is niet altijd handig bij eiwitten etc)
waar het omgaat is waar je stof zich liever voelt. Wanneer hij liever in de sorbens zit, blijft hij op de kolom, wanneer hij liever in de elutie buffer zit, laat hij los van de kolom.
Om te zorgen dat je stof loslaat van je sobens (=kolommateriaal) kan je verschillende dingen veranderen.
De belangrijkste zijn:
pH: door een andere pH laat je stof los van je sorbens
ionsterkte: door andere zout concentratie laat je stof los van je sorbens
% organisch modifier: door andere % organisch modifier laat je stof los van je sorbens (dit is niet altijd handig bij eiwitten etc)
waar het omgaat is waar je stof zich liever voelt. Wanneer hij liever in de sorbens zit, blijft hij op de kolom, wanneer hij liever in de elutie buffer zit, laat hij los van de kolom.