Blocken ELISA

Moderator: ArcherBarry

Reageer
Berichten: 6

Blocken ELISA

Hallo,

Zelf ben ik bezig met het uitvoeren van een ELISA.

Er is alleen 1 probleem waar ik mee zit.

Wat doet de blocking stap precies?

Alvast bedankt

Re: Blocken ELISA

Blocking dient om alle plaatsen die aspecifiek eiwitten kunnen binden te bezetten waardoor je een lagere achtergrond krijgt.

Berichten: 6

Re: Blocken ELISA

Hecht er dus ook niks anders (2de antilichaam) dan de kleuringsstap aan het eiwit dat in de blockingbuffer zit?

Re: Blocken ELISA

Normaal gesproken niet maar je moet wel in de gaten houden waarmee je werkt.

Als je bv anti-humaan albumine gebruikt dan niet blocken met Human Serum Albumine maar met bv melkeiwit.

Berichten: 740

Re: Blocken ELISA

Het is eigenlijk een soort van competitie tussen je block eiwit en je antilichaam.

Hoe specifieker (hogere affiniteit) je antilichaam, hoe beter je resultaat wordt.

Berichten: 6

Re: Blocken ELISA

Heeft iemand toevallig ook nog info waar iedere stap toe dient?

Coaten, Blocken, monster opbrengen e.d.

Ik heb te maken met een sandwich ELISA.

Op het internet vind ik echt weinig informatie.

Ook op de forum vind ik tot mijn spijt geen diepgaande info, waar ik echt iets aan heb.

Alvast bedankt!

Re: Blocken ELISA

Op de site van PIERCE staat veel ondersteunende informatie voor elisa op de volgende link

http://www.piercenet.com/Proteomics/browse...2E-836FE09D8403

Reageer