Restrictie-enzym voor telomeren

Eka

Nog een vraagje dat geen topic waard is maar bij mij wel onbeantwoord blijft:

wat is een platinacomplex?

Ik las namelijk dat het cytostatica Cisplatine of cisplatinum (PtCl2(NH3)2) een platinacomplex is.

Ja sorry dat we nu wel erg afdwalen, maar ik kom ongetwijfeld ook nog met vragen over DNA/RNA

Roy van Heesbeen

Een molecuul waarin een metaal ion "gevangen" zit.

Zoals ijzer bij hemoglobine enz.

Eka

Kun je apoptose zichtbaar maken dmv western blot?

Roy van Heesbeen

ja, mbv caspase eiwitten, en pro-apoptitische eiwitten.

Roy van Heesbeen

p.s. als je nog zeer nieuwe informatie (2006) wilt over telomeren:

http://www.rockefeller.edu/research/abstract.php?id=130

Ik heb vorige week een lectuur van prof. De Lange bijgewoond, haar research groep heeft de afgelopen 2 jaar enorm veel vooruitgang geboekt over de functie en behoud van telomeren (zie publicaties).

Eka

He bedankt!

We gebruiken toch niet aphidicoline, het was er niet.

We gaan nocadozol gebruiken, bij iemand bekend?

Roy van Heesbeen

Ik weet dat sommige afdelingen het her gebruiken voor experimenten en dat het een microtubbuli destabilisatie agent is.

Eka

zelfde werking als taxol?

die caspasen, waar komen die vandaan als een cel apoptose gaat doorlopen (of procaspasen, ook goed)? Van naburige cellen? Van de apoptotische cel zelf? En waar zitten de receptoren voor die eiwitten>

Roy van Heesbeen

Recoptoren zitten op het cel membraam, caspases bevinden zich in de cel, zodra deze geactiveerd worden (door bv fosforylatie en digestie) zijn deze eiwitten weer instaat om andere eiwitten te activeren, dit resulteerd uiteindelijk in het uit elkaar vallen van de chromatiden, vervolgens de cel kern, ER en andere compartimenten en als laaste valt de cel uit elkaar in een hoop exosomen (soort van blaasjes met allerlei cel ingredienten).

pro-caspasen zijn nog niet geactiveerd, deze zijn dus in gezonde cellen aanwezig.

Eka

maar caspasen brekendus niet zelf eiwitten in cellen af?

Roy van Heesbeen

Jawel, ze bezitten proteolytische activiteit.

Caspases staat voor cysteine-aspartic-acid-proteases

Eka

in het protocol voor BrdU incorporatie kwam ik de volgende zaken tegen:

2 N HCL (waar staat die N voor)

Blokken met 50mM glycine (wat wordt hiermee geblokt?)

- DNA denatureren-

nog eens blokken, maar dan met 0,2% gelatine in PBS (wat wordt er nu geblokt?)

- antilichamen toegevoegd specifiek voor BrdU -

spoelen met 0,2% gelatine in PBS (waarom? waarom niet alleen met PBS? daarna moet je nog een keer wassen met alleen PBS)

Ik hoop dat het een beetje duidelijk is wat mn vragen zijn.

Roy van Heesbeen

PBS is een gewone pH neutrale buffer, de tween of gelatine verhoogd de kans op binding door de oppervlakte spanning te verslagen van de buffer.

Wassen doe je om ongebonden AL weg te wassen.

Glycine is een gewone buffer

Blocken doe je om onspecifieke bindingsplaatsen op te vullen zodat je geen foute resultaten krijgt.

De N zal M olair moeten zijn

Fuzzwood

Mja die N staat voor normaal: 2N zwavelzuur komt overeen met een zwavelzuurconcentratie van 1 mol/l. 4N fosforzuur met 1,33 mol/l

Eka

De aldehyde groepen blokken uit het fixatief (paraformaldehyde).

Kunnen die dan reageren met de antilichamen of reageren ze met alle eiwitten?

Wetenschapsforum

Laatste berichten

Nieuwsberichten

Restrictie-enzym voor telomeren

Re: Restrictie-enzym voor telomeren

Re: Restrictie-enzym voor telomeren

Re: Restrictie-enzym voor telomeren

Re: Restrictie-enzym voor telomeren

Re: Restrictie-enzym voor telomeren

Re: Restrictie-enzym voor telomeren

Re: Restrictie-enzym voor telomeren

Re: Restrictie-enzym voor telomeren

Re: Restrictie-enzym voor telomeren

Re: Restrictie-enzym voor telomeren

Re: Restrictie-enzym voor telomeren

Re: Restrictie-enzym voor telomeren

Re: Restrictie-enzym voor telomeren

Re: Restrictie-enzym voor telomeren

Re: Restrictie-enzym voor telomeren