Hallo luitjes!
Voor de bepaling van normaal- en isopentaan in (expandeerbaar) polystyreen hebben we een nieuwe kolom besteld en in gebruik genomen. De oude kolom was erg erg oud, minstens 7 jaren.
Nu zien we schouders aan de pentaanpieken die we nooit eerder in deze mate zagen, maar zelfs ook zeer duidelijk aanwezige 'nieuwe' pieken die we nooit eerder hebben gezien.
Een indicatie: normaal zagen we 3 pieken, n-pentaan, i-pentaan en interne standaard. Soms een klein beetje verontreiniging. Nu zijn er soms zelfs wel 6 duidelijke pieken te zien. Dit is ontstaan vanaf het moment van installatie van de nieuwe kolom.
Iemand een verlaring hiervoor en/of tips om dit op te lossen?
Alvast erg bedankt!
Laatste berichten
-
22:08
wig 11
-
21:37
speciale rel. theorie 12
-
21:22
[scheikunde] vraag Chemie - wat is de oplossing? 11
-
20:14
Aardlek-schakelaar 2
-
15:56
Programmeren met vectoren 6
-
14:53
Straatklok loopt 5 minuten voor 12
-
25 apr
Gravity and gravitation 4
-
25 apr
Bruine vlekken op treinaanwijzerbord 10
-
25 apr
Vogels in de stad zijn goede klussers 2
-
25 apr
Rood laserlicht 3
-
25 apr
Herleiden afmetingen vanaf een foto 21
-
25 apr
[wiskunde] Prijs Product per KG; Alternatief Inzicht 3
-
25 apr
do-re-mi-fa-so vliegtuigen 9
-
25 apr
geen minkowski-ruimte toch? Doe ik dit nou fout? 17
-
25 apr
[natuurkunde] kroon van koning op Syracuse 10
-
25 apr
2013 – Augustus Vraag 3 3
-
24 apr
Vraag 2009 Juli Vraag 5 5
-
24 apr
positie 2
-
24 apr
Schroefdraad berekening 8
-
24 apr
[scheikunde] Kan chloorgas de geleiding van elektriciteit belemmeren? 9
Nieuwsberichten
-
04 mar
Een nieuw soort magnetisme: altermagnetisme
-
31 okt
AI kan via stem diabetes vaststellen 11
-
21 okt
Einstein krijgt wéér gelijk 45
-
07 feb
witter dan wit 20
-
19 jun
irrigatie en de aardas
Problemen nieuwe kolom
Moderator: ArcherBarry
-
- Berichten: 1.153
Re: Problemen nieuwe kolom
Omdat je te maken had met een oude kolom weet je niet precies wat voor een type kolom je laatst gebruikte, door additie van stoffen. Wie zegt dat het kolom materiaal nog het zelfde was in vergelijking toen je hem 7 jaar geleden kocht. Dus misschien heb je wel met een hele andere polariteit kolom gewerkt.
Dus vraag 1: heb je wel de goede type kolom aangeschaft?
Vraag 2: wat heb je gedaan toen je de kolom in je systeem hing? meteen geinjecteerd?
Wat natuurlijk ook kan is dat je oude kolom zo oud was, dat je geen goede scheiding kreeg en altijd naar verkeerde pieken heb gekeken.....
Dus vraag 1: heb je wel de goede type kolom aangeschaft?
Vraag 2: wat heb je gedaan toen je de kolom in je systeem hing? meteen geinjecteerd?
Wat natuurlijk ook kan is dat je oude kolom zo oud was, dat je geen goede scheiding kreeg en altijd naar verkeerde pieken heb gekeken.....
-
- Berichten: 2.953
Re: Problemen nieuwe kolom
Wat natuurlijk ook kan is dat je oude kolom zo oud was, dat je geen goede scheiding kreeg en altijd naar verkeerde pieken heb gekeken.....
Dat denk ik ook. De resolutie van de oude kolom kan zo slecht zijn geworden dat de pieken gingen overlappen. Zie je verbeteringen t.o.v de oude kolom in je chromatogram? Is de piekbreedte bijvoorbeeld kleiner?
-
- Berichten: 873
Re: Problemen nieuwe kolom
Heb je een testmengsel bij je nieuwe kolom gekregen?
Als je de oude kolom nog hebt en de tijd ervoor, injecteer dit testmengsel dan eens op de oude en nieuwe kolom. Dan heb je een vergelijk.
Als je de oude kolom nog hebt en de tijd ervoor, injecteer dit testmengsel dan eens op de oude en nieuwe kolom. Dan heb je een vergelijk.
En misschien kijk je nu wel naar de verkeerde pieken.Wat natuurlijk ook kan is dat je oude kolom zo oud was, dat je geen goede scheiding kreeg en altijd naar verkeerde pieken heb gekeken.....
-
- Berichten: 25
Re: Problemen nieuwe kolom
Dank jullie voor de reacties. We hebben dezelfde kolom als we voorheen gebruikten, alleen dan nieuw. Merkwaardig genoeg hebben we nú tailing, terwijl we dit voorheen minder hadden. We zullen eens een nieuwe voorkolom installeren.
Mogelijk hebben we het probleem al gevonden, en in dat geval zal het een samenloop van omstandigheden zijn. We hebben namelijk het zuiver oplosmiddel (tolueen) geïnjecteerd, en daar komen na 8 minuten pieken (verontreiniging) tevoorschijn, terwijl we bij een monster na ongeveer 6,5 minuut alweer het volgende monster (handmatig) injecteren.
Mogelijk meer vervuild oplosmiddel dan anders, heel toevallig, maar de rest van het chromatogram ziet er exact hetzelfde eruit. Verder geeft een injectie van elk éérste monster uit een run een 'schoon' chromatogram zonder bijpiekjes. Ik vermoed dus dat alle componenten uit het oplosmiddel gewoon nog niet van de kolom zijn, en dat deze componenten sinds de nieuwe fles in grotere concentratie aanwezig zijn. En ik hoop het, dan is een iets langere analysetijd een simpele oplossing. Ik rapporteer het nog! Nogmaals bedankt!
Mogelijk hebben we het probleem al gevonden, en in dat geval zal het een samenloop van omstandigheden zijn. We hebben namelijk het zuiver oplosmiddel (tolueen) geïnjecteerd, en daar komen na 8 minuten pieken (verontreiniging) tevoorschijn, terwijl we bij een monster na ongeveer 6,5 minuut alweer het volgende monster (handmatig) injecteren.
Mogelijk meer vervuild oplosmiddel dan anders, heel toevallig, maar de rest van het chromatogram ziet er exact hetzelfde eruit. Verder geeft een injectie van elk éérste monster uit een run een 'schoon' chromatogram zonder bijpiekjes. Ik vermoed dus dat alle componenten uit het oplosmiddel gewoon nog niet van de kolom zijn, en dat deze componenten sinds de nieuwe fles in grotere concentratie aanwezig zijn. En ik hoop het, dan is een iets langere analysetijd een simpele oplossing. Ik rapporteer het nog! Nogmaals bedankt!
-
- Berichten: 25
Re: Problemen nieuwe kolom
Ja, dit is al gebeurd, zonder resultaat. Trouwens, met een nieuwe kolom zou er toch geen verontreiniging mogen zijn? Hoe dan ook hij is uitgestookt op 250 gr.C voor een aantal uren en we meten bij 100 gr. C.
MAAR het probleem is opgelost. De runtime stond te kort. We injecteerden te snel. Voorheen merkten we dit probleem niet, maar blijkbaar is de tolueen van mindere kwaliteit dan voorheen. Oplossing is makkelijk, 5 minuutjes langer wachten alvorens opnieuw te injecteren.
Nu nog een beetje aan de tailing werken..
MAAR het probleem is opgelost. De runtime stond te kort. We injecteerden te snel. Voorheen merkten we dit probleem niet, maar blijkbaar is de tolueen van mindere kwaliteit dan voorheen. Oplossing is makkelijk, 5 minuutjes langer wachten alvorens opnieuw te injecteren.
Nu nog een beetje aan de tailing werken..
-
- Berichten: 242
Re: Problemen nieuwe kolom
Misschien iets minder injecteren? Tailing krijg je (volgens mij dan toch) vooral doordat je teveel injecteerd...
-
- Berichten: 11.177
Re: Problemen nieuwe kolom
9 van de 10 keer duidt dat inderdaad op overbelasting. 1 van de 10 keer zal dit een andere oorzaak hebben.
-
- Berichten: 6.314
Re: Problemen nieuwe kolom
Wat ik me nog herinner van chromatografie: tailing is geen aanwijzing van overloading, juist fronting wijst op teveel sample.
Tailing had dacht ik te maken met het mogelijk aanwezig zijn van geladen groepen in het molecuul (NHx+?)
Tailing had dacht ik te maken met het mogelijk aanwezig zijn van geladen groepen in het molecuul (NHx+?)
You can't possibly be a scientist if you mind people thinking that you're a fool. (Douglas Adams)
-
- Berichten: 13
Re: Problemen nieuwe kolom
Kun je dan niet beter nieuwe tolueen aanschaffen? Dat lijkt me goedkoper dan telkens 5 minuten langer te moeten wachten.el-engel schreef:
MAAR het probleem is opgelost. De runtime stond te kort. We injecteerden te snel. Voorheen merkten we dit probleem niet, maar blijkbaar is de tolueen van mindere kwaliteit dan voorheen. Oplossing is makkelijk, 5 minuutjes langer wachten alvorens opnieuw te injecteren.
-
- Berichten: 4.771
Re: Problemen nieuwe kolom
Dat dacht ik ook, beryllium: fronting is overload. Tailing ontstaat als de analyt te polair is voor de gebruikte kolom.Wat ik me nog herinner van chromatografie: tailing is geen aanwijzing van overloading, juist fronting wijst op teveel sample.
Tailing had dacht ik te maken met het mogelijk aanwezig zijn van geladen groepen in het molecuul (NHx+?)
-
- Berichten: 677
Re: Problemen nieuwe kolom
In het geval de kolom goed is (waar ik hier niet direct aan twijfel) heeft tailing vaak te maken met dood volume. Injecteer 1 µL hexaan en kijk of de piek redelijk symmetrisch is. Indien niet, dan zit er allicht teveel volume aan de injectorkant.
-
- Berichten: 2.399
Re: Problemen nieuwe kolom
Te polair vind ik geen goede omschrijving. Ik kan tal van mega polaire verbindingen beschrijven die geen tailing zullen geven. Het draait meer om actieve verbindingen zoals aminen en carbonzuren.Marjanne schreef:Dat dacht ik ook, beryllium: fronting is overload. Tailing ontstaat als de analyt te polair is voor de gebruikte kolom.Wat ik me nog herinner van chromatografie: tailing is geen aanwijzing van overloading, juist fronting wijst op teveel sample.
Tailing had dacht ik te maken met het mogelijk aanwezig zijn van geladen groepen in het molecuul (NHx+?)
Teveel volume aan de injector kant lijkt me ook onwaarschijnlijk, omdat je chromatografie toepast en de compounds zich automatisch zullen focussen aan het begin van de kolom.
Vraag voor de vraagsteller, gebruik je een retention gap?
Ik denk meer aan een slechte kolom installatie. Ergens zit waarschijnlijk een stukje doodvolume wat als een mixer opereert.
-
- Berichten: 25
Re: Problemen nieuwe kolom
De tailing is opgelost. We hebben de liner eruit gehaald, en die zat vol met troep. Er zijn nieuwe besteld, en tot die er zijn hebben we het stukje glaswol in de liner vervangen. Vanaf dat moment zijn de pieken pefect gescheiden, en geen tailing.
We hebben het oude, het huidige en nieuw tolueen gecontroleerd, en overal zit de 'verontreiniging' in. Blijkbaar zagen we voorheen gewoon deze verontreiniging niet door de versleten kolom.
Heel erg bedankt voor de hulp, onze analyse is weer okay
Ohja, een toename van analysetijd is er eigenlijk niet, want vroeger was de analysetijd ook 10 minuten. Blijkbaar is dat in de loop van de jaren verkort, omdat er toch geen pieken meer kwamen na 5 min (wat dus naar mijn idee komt door de versleten kolom).
We hebben het oude, het huidige en nieuw tolueen gecontroleerd, en overal zit de 'verontreiniging' in. Blijkbaar zagen we voorheen gewoon deze verontreiniging niet door de versleten kolom.
Heel erg bedankt voor de hulp, onze analyse is weer okay
Ohja, een toename van analysetijd is er eigenlijk niet, want vroeger was de analysetijd ook 10 minuten. Blijkbaar is dat in de loop van de jaren verkort, omdat er toch geen pieken meer kwamen na 5 min (wat dus naar mijn idee komt door de versleten kolom).
