Springen naar inhoud

Dode volume van HPLC


  • Log in om te kunnen reageren

#1

foad

    foad


  • >25 berichten
  • 31 berichten
  • Gebruiker

Geplaatst op 22 februari 2007 - 21:23

Weet iemand de formule van de dode volume en hoe bepaal je de dode volume van een apparaat(HPLC). Verder wat verwacht je van K (retentiefactor) als je op een ander apparaat werkt, met bv. Een groter dood volume.

Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

Napoleon1981

    Napoleon1981


  • >1k berichten
  • 2399 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 23 februari 2007 - 05:38

Ik ga wat tegen vragen stellen.......

Wat is dood volume in een HPLC?
Hoe denk je dan dat je het berekenen kan?

Je kunt het bepalen door je kolom tussen de injector en detector uit te halen en de tubing met een 0 dead volume connector te verbinden.

Hoe wordt de K factor berekent? Wordt er misschien gecorrigeerd voor het dode volume?

#3

michiel11_CF

    michiel11_CF


  • >25 berichten
  • 27 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 23 februari 2007 - 10:09

Zoals hierboven al in woorden staat omschreven:

dode tijd= bruto retentietijd - netto retentietijd
Meestal is er een injectiepiek te zijn, de tijd die het kost voordat de injectiepiek eruit komt heet de dode tijd.

de retentiefactor k' = netto retentietijd/dode tijd

#4

Jooken

    Jooken


  • >250 berichten
  • 677 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 23 februari 2007 - 13:11

Om het dode volume van een HPLC toestel te bepalen bestaan er verschillende technieken. Van eenvoudig tot meer gesofisticeerd:

1. heel eenvoudig: de tijd van de basislijnverstoring na de injectie (Dit zie je enkel als het monster is opgelost in een ander solvent dan het eluent)

2. Vrij eenvoudig: een benaderende formule

tM = (L.dc2)/2F

met L de kolomlengte in cm; dc de kolomdiameter in cm en F het debiet in ml/min

(de precisie van deze formule is +/- 10%)

3. Een eenvoudig experiment
Injecteer uracil. Deze verbinding wordt (nagenoeg) niet weerhouden op een C18 kolom.

4. Een gesofisticeerd experiment:
Injecteer een homologe reeks van tenminste 4 verbindingen. Wij gebruiken meestal methyl- ethyl-, propyl- en butyl parabens. Maak een plot van de retentietijd van C(n+1) ten opzichte van de retentietijd van C(n) met n het aantal koolstofatomen van de homologe verbinding. Dit geeft een rechte:

tR,(n+1) = tR,(n).A - (A-1).tM

Bereken uit helling en intercept tM.

Deze laatste methode is de meest nauwkeurige, maar bedenk wel dat tM ook functie is van de samenstelling van de mobiele fase. Er bestaat dus niet één, definitieve waarde van tM

#5

knoerd

    knoerd


  • 0 - 25 berichten
  • 6 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 23 februari 2007 - 14:27

Hallo,

Techniek 4 heb ik al eens uitgevooerd en werkt uitstekend.
je kan zo je systemen/onderdelen goed clasificeren.
Je kan dan ook nog eens je pieken gaan simuleren aan de hand van deze lijn en een minimum aan dood volume eis stellen voor een bepaalde resolutie.

groeten,
Sjoerd





0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures