Springen naar inhoud

vectoren


  • Log in om te kunnen reageren

#1

rappen-eddy

    rappen-eddy


  • >250 berichten
  • 774 berichten
  • Gebruiker

Geplaatst op 01 maart 2007 - 22:51

hallo,
voor een gen in een bacterie over te brengen moet men gebruik maken van een vector. Dit kan bv een virus zijn; of men kan werken met hitte shock handelingen om bv een plasmide in een bacterie te brengen.

Maar welke vectoren kan men nog gebruiken, en kunnen jullie deze misschien een beetje toelichten, want ik heb al super veel sites afgezocht (ook engels talige)
:oops:
Alvast bedankt !

Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

Roy van Heesbeen

    Roy van Heesbeen


  • >250 berichten
  • 740 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 02 maart 2007 - 14:49

BAC's YAC's en de gewone bacteriele vectoren (gemodificeerde plasmiden) met een selectie gen

De meest bekende vector is de pUC vector.

Om je gen in te brengen bij bacterien, kloneer je de vector eerst.
m.a.w. Je knipt met restrictie enzymen de vector open op de MCS (multiple cloning site) en je gen van interesse wordt er met dezelfde uiteinden van het gebruikte restrcite enzym ingezet met behulp van een ligase enzym.
Op deze vector liggen nu naast je gen van interesse, een aanwezig selectiegen (bijv. ampicilline res. gen) en een origen of replication voor het kopieeren van vector in de bacterie.

Vervolgens transformeer je de vector in bacterien, via bijv. een heatshock of electroporatie. Deze bacterien kweek je vervolgens op een plaat met een selectie gen (meestal antibiotica, waarvan het resitentiegen aanwezig is in de vector).
De gevormde kolonies hebben de vecotor opgenomen (resistent tegen de antibiotica) en bevatten dus je gen van interesse.

Deze kolonie kun je later rein opkweken in vleoibaar medium en invriezen en gebruiken voor vervolg experimenten.





0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures