vectoren

Moderator: ArcherBarry

Forumregels
(Middelbare) school-achtige vragen naar het forum "Huiswerk en Practica" a.u.b.
Zie eerst de Huiswerkbijsluiter
Reageer

Bericht 01-03-'07, 22:51

rappen-eddy

Berichten: 774

vectoren

hallo,

voor een gen in een bacterie over te brengen moet men gebruik maken van een vector. Dit kan bv een virus zijn; of men kan werken met hitte shock handelingen om bv een plasmide in een bacterie te brengen.

Maar welke vectoren kan men nog gebruiken, en kunnen jullie deze misschien een beetje toelichten, want ik heb al super veel sites afgezocht (ook engels talige)

:oops:

Alvast bedankt !
Omhoog

Bericht 02-03-'07, 14:49

Roy van Heesbeen

Berichten: 740

Re: vectoren

BAC's YAC's en de gewone bacteriele vectoren (gemodificeerde plasmiden) met een selectie gen

De meest bekende vector is de pUC vector.

Om je gen in te brengen bij bacterien, kloneer je de vector eerst.

m.a.w. Je knipt met restrictie enzymen de vector open op de MCS (multiple cloning site) en je gen van interesse wordt er met dezelfde uiteinden van het gebruikte restrcite enzym ingezet met behulp van een ligase enzym.

Op deze vector liggen nu naast je gen van interesse, een aanwezig selectiegen (bijv. ampicilline res. gen) en een origen of replication voor het kopieeren van vector in de bacterie.

Vervolgens transformeer je de vector in bacterien, via bijv. een heatshock of electroporatie. Deze bacterien kweek je vervolgens op een plaat met een selectie gen (meestal antibiotica, waarvan het resitentiegen aanwezig is in de vector).

De gevormde kolonies hebben de vecotor opgenomen (resistent tegen de antibiotica) en bevatten dus je gen van interesse.

Deze kolonie kun je later rein opkweken in vleoibaar medium en invriezen en gebruiken voor vervolg experimenten.
Omhoog
Reageer

Terug naar “Scheikunde”