Springen naar inhoud

Mobiele fase


  • Log in om te kunnen reageren

#1

Marie-Louise_CF

    Marie-Louise_CF


  • 0 - 25 berichten
  • 21 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 07 maart 2007 - 15:52

Hoi,

Ik ben met verschillende testen bezig op de HPLC. Een van de dingen waar ik naar gekeken heb is de mobiele fase. De mobiele fase die ik standaard bij deze bepaling gebruik is:

1450 ml chloroform, 950 ml n-heptaan, 100 ml MeOH, 12.5 ml THF en 1.25 ml HAc. (Mob 1)

Ik heb de hoeveelheid van n-heptaan gevarieerd met - 10% (Mob 2) en + 10% (Mob 3).

De retentieijden veranderen als volgt:
Mob 1. 2,581 min;
Mob 2. 2,487 min;
Mob 3. 2,689 min.

Des te meer n-heptaan des te groter de retentietijd. Maar meer organisch betekend toch een kortere retentietijd? Wie kan mij helpen?

Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

Napoleon1981

    Napoleon1981


  • >1k berichten
  • 2399 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 07 maart 2007 - 16:17

Als jij niet zegt wat voor kolom (dus type chromatografie) je gebruikt, dan kan niemand je verder helpen.

Meer organisch? Alle componenten die jij gebruikt als mobiele fase vallen onder deze noemer, je gaat van 100% organisch naar 100% organisch. Je gebruikt normal phase chromatografie?

Hint: wat gebeurd er met de polariteit van de totale oplossing? In het geval van normalphase, wat adsorptie chromatografie is, welk soort loopmiddel zal de geadsorbeerde analiet moleculen beter "displacen"?

Veranderd door Napoleon1981, 07 maart 2007 - 16:23


#3

Marie-Louise_CF

    Marie-Louise_CF


  • 0 - 25 berichten
  • 21 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 07 maart 2007 - 16:33

Oh sorry.

Ik gebruik een chromspher Si. (reversed phase chromatografie)

#4

Napoleon1981

    Napoleon1981


  • >1k berichten
  • 2399 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 07 maart 2007 - 16:35

Weet je zeker dat dit geen Normal phase is? Si staat voor silica, dit is dus normal phase chromatografie.

In normal phase chromatografie gebruik je organische oplosmiddelen, en vaak acetic acid om te komen dat er water in je systeem komt, wat de silica deactiveert.

#5

Marie-Louise_CF

    Marie-Louise_CF


  • 0 - 25 berichten
  • 21 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 07 maart 2007 - 17:06

Ik ging dr van uit wat mn stagebegeleider zegt. :oops:

Silicagel is polair.
Mn te bepalen component is apolair
Mobiele fase is apolair.

De retentietijd wordt langer dan zal de mob fase meer polair worden, omdat de component langer in de stationaire fase verblijft.

#6

Napoleon1981

    Napoleon1981


  • >1k berichten
  • 2399 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 07 maart 2007 - 17:49

Goed het zit dus zo.....

1) Vergeet het principe verdelings chromatografie, wanneer je normal phase gebruikt.

2) Silicagel is idd de polaire fase. Silica gel is ook vast, dus het analiet adsorbeert aan je silica gel

3) Hoe krijg je het van silicagel af? door het weg te duwen met iets dat polair is.

Wanneer jij dus meer heptaan gaat gebruiken neemt de polariteit van je solvent af, dus ook het vermogen om geadsorbeerd analiet te verdringen van het vaste silica ----> gevolg retentie tijd neemt toe.

#7

Marie-Louise_CF

    Marie-Louise_CF


  • 0 - 25 berichten
  • 21 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 08 maart 2007 - 10:30

SUPER! Dank je wel! :oops:





0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures