Ik heb een proef gedaan waarbij ik de specifieke activiteit van protease heb gemeten..
Ik heb 3 protease preparaten van 0,1 U/ml 0,2 U/ml en 0,3 U/ml. Op het etiket staat 6,9 U/mg....
Ik heb 10 mg ingwogen en opgelost in 230 ml Tris-buffer= 0,3 U/ml. Hieruit heb ik 20 ml pepipetteerd en aangevuld tot 30 ml met Trisbuffer= 0,2 U/ml. En 10 ml uit 230 ml en dat ook aangevuld met Trisbuffer= 0,1 U/ml...
Dit heeft na het toevoegen van caseïne-oplossing (1g/100ml pH=9) 30 minuten geïncubeerd..
Ik heb de reactie gestopt met TCA-oplossing. Het neergeslagen eiwit heb ik met een vouw-filter eruit gehaald en ik heb de helder overgebleven oplossing gemeten bij een Extinctie van 280 nm... ik heb als referentie-oplossing tyrosine gebruikt...
Nu moet ik de specifieke activiteit van het protease-preparaaat als het aantal umol product dat met minuut door 1mg protease wordt omgezet...
Nu heeft mijn leraar wel het een en ander uitgelegt maar ik snap er niets van...
Wie kan mij hierbij helpen??????
8-[