Springen naar inhoud

Algemene VB vs Selectief medium


  • Log in om te kunnen reageren

#1

Charlotte85

    Charlotte85


  • 0 - 25 berichten
  • 5 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 17 maart 2007 - 16:41

Ik moet voor een klein onderzoek een proefopstelling uitwerken.
DOEL: Een kwantitatieve vergelijking tussen het aantal MRSA kolonies dat op een bloedplaat groeit en van dit zelfde staal kijken of er op een selectief media, MRSAID dezelfde kwantiteit groeit. (maw is het media niet te selectief waardoor een gering aantal kolonies niet zo worden opgemerkt: stel als er op de bloedplaat 200 kolonies groeien en op de MRSAID 20 kolonies, zou dit problemen kunnen opleveren --> 10 op de blp zou dan maar 1 meer zijn)

Mijn grote vraag hoe kun je ervoor zorgen dat je +/- weet als je bloedplaat ent dat er x aantal kolonies opstaan zodat ze nog telbaar zijn. Vertrekpunt zijn MRSA stammen massief geent op MuellerHintonAgar

Hopelijk verstaan jullie waar mijn probleem ligt en krijg ik een antwoord.

Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

Beryllium

    Beryllium


  • >5k berichten
  • 6314 berichten
  • Minicursusauteur

Geplaatst op 18 maart 2007 - 11:53

Je bedoelt neem ik aan dat je wel kolonies krijgt maar niet zoveel dat ze niet meer als individueel te tellen zijn?

Zou je niet iets als een verdunning kunnen maken, dat je 1 'stock' maakt van MRSA vanaf je MH agar, en die doorverdunt? Van elke verdunning breng je dan bijvoorbeeld 1 microliter over op de bloedagar/MRSAID en plaat je uit. Dan kun je ten eerste zien welke verdunning goed is voor tellen en je kan tegelijkertijd de kolonies tellen.
You can't possibly be a scientist if you mind people thinking that you're a fool. (Douglas Adams)

#3

Biohazzard

    Biohazzard


  • >25 berichten
  • 27 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 19 maart 2007 - 16:37

Als je een kolonie pakt heb je iedere maal een andere hoeveelheid waardoor je telkens veranderende uitslagen krijgt.

wat mij persoonlijk beter lijkt is dat je een cultuur ophoopt in een vloeibaar medium (BHI of NB). Wij gaan er hier van uit dat een 24 uurs cultuur ongeveer 1*10 tot de 9e kve/ml bevat. Vanhieruit kunt je een mooie verdunningsreeks maken. Als je spreidplaten hebt dan zou ik de 1*10 4e, 3e en 2e uitplaten. Dan heb je altijd wel een mooie telbare plaat.

Dat waren mijn 2 centjes.

groetjes, Martijn

#4

Charlotte85

    Charlotte85


  • 0 - 25 berichten
  • 5 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 26 maart 2007 - 17:17

Misschien beetje domme vraag, maar als je schrijft: "een cultuur ophoopt in een vloeibaar medium " is dat onafhankelijk van de beginhoeveelheid? Of ik nu één MRSA kolonie neem van mijn plaat en in de bouillon laat overnachten of drie/vier kolonies?

#5

rob123

    rob123


  • 0 - 25 berichten
  • 21 berichten
  • Gebruiker

Geplaatst op 02 april 2007 - 13:21

Als ik het goed heb is dit wel afhankelijk van de beginhoeveelheid. Als je begint met minder m.o's eindig je ook met minder m.o's.

#6

Biohazzard

    Biohazzard


  • >25 berichten
  • 27 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 05 april 2007 - 09:03

Sorrie voor mijn late reactie. De ophoping is onafhankelijk van de beginhoeveelheid. Een cultuur in een vloeibaar medium zal na een tijdje (24 uur) een evenwicht bereiken en niet meer toenemen. Meestal ligt dit punt op 1.000.000.000 kve/ml.

Als je daarna een verdunningsreeks maakt dan heb je op een gegeven moment een buis met een bepaalde hoeveelheid die telbaar is. Als je nu op de bloedplaat een bepaalde hoeveelheid pipetteerd en er groeien 200 kolonies en je pipetteerd uit dezelfde buis op de selectieve plaat en er groeien maar 100 kolonies dan weet je toch hoeveel er geremd worden.

Hopelijk is het zo duidelijk.

MVG, Martijn

#7

Charlotte85

    Charlotte85


  • 0 - 25 berichten
  • 5 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 07 april 2007 - 14:04

Geplaatste afbeelding

Is dit dan te verklaren hiermee. Dat je in de stationaire fase zit, of is er een andere verklaring voor.

#8

Biohazzard

    Biohazzard


  • >25 berichten
  • 27 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 07 april 2007 - 23:13

Dat klopt, na 24 uur zitten ze in de stationaire fase en zal het aantal gelijk blijven. Na een tijdje is het "eten" op en zullen er meer doodgaan dan bijkomen en dan daalt het aantal levende cellen.

De staionaire fase wil gewoon zeggen dat er net zoveel bijkomen als er doodgaan, dit komt vooral door ruimtegebrek. Als het voedsel opraakt dan zal het aantal pas afnemen.

mvg, biohazzard





0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures