Springen naar inhoud

basislijn HPLC met gradient


  • Log in om te kunnen reageren

#1

tequila boy

    tequila boy


  • >1k berichten
  • 1490 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 12 april 2007 - 13:30

kan het kloppen dat mijn basislijn anders gaat verlopen als ik een gradient gebruikt bij HPLC (ik ga van 75% ACN naar 100% ACN en weer naar 75 ACN)
zoja hoe kan ik dat tegen gaan?

Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

Napoleon1981

    Napoleon1981


  • >1k berichten
  • 2399 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 12 april 2007 - 15:14

Dat kan, dat komt omdat je ook de samenstelling van je mobiele fase ziet veranderen. Hogere golflengtes hebben hier minder last van wanneer je UV gebruikt. Maar dit probleem komt nou eenmaal met gradient elutie :oops:

#3

mmaarr

    mmaarr


  • >100 berichten
  • 184 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 12 april 2007 - 19:33

Gebruik maken van ACN met HPLC-grade, deze heeft een lage UV-cut-off.

#4

tequila boy

    tequila boy


  • >1k berichten
  • 1490 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 13 april 2007 - 06:54

de ACN die ik hier gebruik is voor vloeistofchromatografie (isocratisch-> heeft hier mee te maken lijkt mij)

#5

Napoleon1981

    Napoleon1981


  • >1k berichten
  • 2399 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 13 april 2007 - 13:37

Zelfs met HPLC grade solvents zul je hier last van blijven houden...

#6

tequila boy

    tequila boy


  • >1k berichten
  • 1490 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 13 april 2007 - 13:48

Hogere golflengtes hebben hier minder last van wanneer je UV gebruikt


alleen meet ik mijn stof bij een lage golflengte :oops:

#7

Beryllium

    Beryllium


  • >5k berichten
  • 6314 berichten
  • Minicursusauteur

Geplaatst op 13 april 2007 - 14:16

Lagere golflengte = meer naar UV.
Welke golflengte gebruik je nou?
You can't possibly be a scientist if you mind people thinking that you're a fool. (Douglas Adams)

#8

tequila boy

    tequila boy


  • >1k berichten
  • 1490 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 13 april 2007 - 14:19

geen specifieke golflengte ik meet gewoon van 190nm-400nm
maar ik merk gewoon dat mijn stof het beste meetbaar is rond de 225nm Geplaatste afbeelding

#9

Beryllium

    Beryllium


  • >5k berichten
  • 6314 berichten
  • Minicursusauteur

Geplaatst op 13 april 2007 - 14:46

Ja, da's dus wel UV 8-[ met een DAD nog wel.
Heb je eigenlijk wel last van de driftende baseline? Want als je er geen last van hebt bij je analyse zou ik me er niet druk om maken :oops:
You can't possibly be a scientist if you mind people thinking that you're a fool. (Douglas Adams)

#10

tequila boy

    tequila boy


  • >1k berichten
  • 1490 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 13 april 2007 - 14:49

zou ik er anders een topic over openen?

ik heb een analyse van 35 minuten waarbij de basislijn op begint te lopen vanaf de 10 minuten (omschakeling van 75% ACN naar 100% ACN) vervolgens loop deze oplopend door tot 29 minuten(terugschakeling van 100% ACN naar 75% ACN) en daar daalt ie weer naar de beginwaarde.

#11

Beryllium

    Beryllium


  • >5k berichten
  • 6314 berichten
  • Minicursusauteur

Geplaatst op 13 april 2007 - 14:53

zou ik er anders een topic over openen?

Ja dat begrijp ik :oops:

Ik vraag me alleen af wat de reden is dat je er last van hebt. Loopt je detector van de range af, kun je je analyse niet goed quantitatief doen, of vind je de chromatogrammen gewoon niet mooi..?
That's all...
You can't possibly be a scientist if you mind people thinking that you're a fool. (Douglas Adams)

#12

tequila boy

    tequila boy


  • >1k berichten
  • 1490 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 13 april 2007 - 14:55

nou ik ben vanuit school gewend met een vrij vlakke basislijn te werken en nu ik op stage ben krijg ik dat niet 8-[ dus daarom dacht ik laat ik dat hier eens even navragen ;) :oops:
misschien dat het niet erg is maar je kan beter even bij je medeforummers vragen toch

#13

Jooken

    Jooken


  • >250 berichten
  • 677 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 13 april 2007 - 15:47

Een oplopende basislijn bij gradiŽnten kan ook te maken hebben met de zuiverheid van het gebruikte water: bij lage % ACN accumuleer je onzuiverheden op de top van de kolom, die eraf komen bij hogere percentages. Gebruik enkel ultrapuur water, bij voorkeur dagvers bereid.

#14

tequila boy

    tequila boy


  • >1k berichten
  • 1490 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 16 april 2007 - 06:50

ja maar waar ligt dan de grens van de lage concentratie ACN?
ik heb een gradient die loopt van 75% ACN naar 100% ACN en dan weer terug naar 75% ACN :oops:

#15

tequila boy

    tequila boy


  • >1k berichten
  • 1490 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 01 mei 2007 - 13:45

Geplaatste afbeelding ik heb het er met mij begeleider over gehad en we zullen eerst kijken hoever we met GC-MS komen ipv HPLC :oops:





0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures