Hallo allemaal,
Ik heb laatst een proef gedaan op de HPLC. Ik probeerde paracetamol en cafeine te scheiden van elkaar. Daartoe heb ik 2 monsteroplossing geinjecteerd.
1e monsteroplossing is paracetamol en cafeine opgelost in 100% methanol
2e monsteroplossing is paracetamol en cafeine opgelost in 100% water.
De eluenssamenstelling is 70% MeOH/30% milli-Q water.
De 2e monsteroplossing komt er na ongeveer 1,5 minuut eruit(snelle retentietijd). Ik zie 2 symmetrische pieken die bijna helemaal basislijn gescheiden.
Maar de 1e monsteroplossing vertoont een rare asymmetrische piek. Komt ook na ongeveer 15 minuut uit maar heeft een rare 1e piek. er zit een hobbel in dat piek.
Ik snap niet waarom. Ik denk dat het aan de 100% methanol ligt waar ik mijn paracetamol en cafeine heb opgelost. Kan iemand mij helpen met een betere verklaring?
alvast bedankt Kees!!
Laatste berichten
-
22:08
wig 11
-
21:37
speciale rel. theorie 12
-
21:22
[scheikunde] vraag Chemie - wat is de oplossing? 11
-
20:14
Aardlek-schakelaar 2
-
15:56
Programmeren met vectoren 6
-
14:53
Straatklok loopt 5 minuten voor 12
-
25 apr
Gravity and gravitation 4
-
25 apr
Bruine vlekken op treinaanwijzerbord 10
-
25 apr
Vogels in de stad zijn goede klussers 2
-
25 apr
Rood laserlicht 3
-
25 apr
Herleiden afmetingen vanaf een foto 21
-
25 apr
[wiskunde] Prijs Product per KG; Alternatief Inzicht 3
-
25 apr
do-re-mi-fa-so vliegtuigen 9
-
25 apr
geen minkowski-ruimte toch? Doe ik dit nou fout? 17
-
25 apr
[natuurkunde] kroon van koning op Syracuse 10
-
25 apr
2013 – Augustus Vraag 3 3
-
24 apr
Vraag 2009 Juli Vraag 5 5
-
24 apr
positie 2
-
24 apr
Schroefdraad berekening 8
-
24 apr
[scheikunde] Kan chloorgas de geleiding van elektriciteit belemmeren? 9
Nieuwsberichten
-
04 mar
Een nieuw soort magnetisme: altermagnetisme
-
31 okt
AI kan via stem diabetes vaststellen 11
-
21 okt
Einstein krijgt wéér gelijk 45
-
07 feb
witter dan wit 20
-
19 jun
irrigatie en de aardas
Paracetamol en cafeine scheiden op HPLC
Moderator: ArcherBarry
-
- Berichten: 53
Paracetamol en cafeine scheiden op HPLC
Wie zoekt, die vindt... waar een wil is, is een weg en op een dag.... we find the final frontier!
-
- Berichten: 11.177
Re: Paracetamol en cafeine scheiden op HPLC
Het beste is om je monster in je eluens op te lossen. Misschien heb je nu de pech dat de pieken elkaar overlappen (ik lees nergens dat je 2 pieken krijgt)
-
- Berichten: 53
Re: Paracetamol en cafeine scheiden op HPLC
ja sorry, dat had ik niet vermeld. Maar ik krijg inderdaad 2 pieken. De eerste is paracetamol waar ik een rare hobbel zie en de 2e piek is cafeine.
Maar bij de 2 monsteroplossing overlappen de 2 pieken zich wel. Daar heb je wel gelijk in. Maar waarom? Weet je dat toevallig?
Maar bij de 2 monsteroplossing overlappen de 2 pieken zich wel. Daar heb je wel gelijk in. Maar waarom? Weet je dat toevallig?
Wie zoekt, die vindt... waar een wil is, is een weg en op een dag.... we find the final frontier!
-
- Berichten: 2.399
Re: Paracetamol en cafeine scheiden op HPLC
Dit is een heel bekend fenomeen. De oplossing met 100% MeOH is sterker dan je mobiele fase, wat je dus krijgt is een korte gradient op je kolom. De methanol in je oplossing zal wat analiet mee nemen verder de kolom in, en je krijgt dus een hele brede band.
Les: het sample mag nooit meer modifier bevatten dan je mobiele fase!
Les: het sample mag nooit meer modifier bevatten dan je mobiele fase!
-
- Berichten: 53
Re: Paracetamol en cafeine scheiden op HPLC
Hey toppie!!! Nu begrijp ik het eindelijk.
Ik moest lering uit een experiment trekken en nu snap ik het !!!!
Ik moest lering uit een experiment trekken en nu snap ik het !!!!
Wie zoekt, die vindt... waar een wil is, is een weg en op een dag.... we find the final frontier!
-
- Berichten: 11.177
Re: Paracetamol en cafeine scheiden op HPLC
Daarom dus ook mijn tip dat je zoveel mogelijk het eluens moet gebruiken om je monster in op te lossen. Dan lijkt het eigenlijk of je puur monster injecteert 
-
- Berichten: 53
Re: Paracetamol en cafeine scheiden op HPLC
dus in principe zou ik mijn monster kunnen oplossen in hetzelfde eluenssamenstelling? Dan zou je mooie basislijn gescheiden pieken krijgen...
Wie zoekt, die vindt... waar een wil is, is een weg en op een dag.... we find the final frontier!
-
- Berichten: 53
Re: Paracetamol en cafeine scheiden op HPLC
oh wacht, dat is hetzelfde wat jij zegt! haha...
Wie zoekt, die vindt... waar een wil is, is een weg en op een dag.... we find the final frontier!
-
- Berichten: 2.399
Re: Paracetamol en cafeine scheiden op HPLC
Ik zelf hou van een zwakker eluens, dan gebruik je die gradient in een omgekeerde volgorde. De compound focussed op je LC kolom en daardoor is de variantie van injector en tubing naar de injector bijna 0 
-
- Berichten: 53
Re: Paracetamol en cafeine scheiden op HPLC
die is wel heel slim
Wie zoekt, die vindt... waar een wil is, is een weg en op een dag.... we find the final frontier!
