Springen naar inhoud

MES buffer voor eiwitten


  • Log in om te kunnen reageren

#1

Science Kim

    Science Kim


  • 0 - 25 berichten
  • 3 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 30 oktober 2007 - 01:35

Hoi allemaal,

Ik ben bezig met eiwitten te analyseren. Ik heb de eiwitten gezuiverd en gebruik gemaakt van freeze-drying om ze in poedervorm aan verschillende buffers te kunnen toevoegen voor verschillende analyse technieken.
De eiwitten zijn normaal gesproken in een lage aw waarde met ongeveer pH 5.

Ik wil IEF uitvoeren en de beste buffer om ze in op te lossen is MES buffer. Het probleem is dat ik nergens iets kan vinden over in welke concentratie MES ik het beste mijn eiwitten kan oplossen voor IEF.

Ik hoop dat iemand iets weet hierover en mij kan helpen of een goede link heeft waar ik meer informatie kan vinden.

Kim

Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

Napoleon1981

    Napoleon1981


  • >1k berichten
  • 2399 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 30 oktober 2007 - 16:52

Ik ben geen biochemie pro, maar als je een buffer rond de pKa kiest is 10 tot 50mM vaak al genoeg.

#3

Science Kim

    Science Kim


  • 0 - 25 berichten
  • 3 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 30 oktober 2007 - 21:24

thanks! ik ga kijken hoe het uitpakt.

#4

Science Kim

    Science Kim


  • 0 - 25 berichten
  • 3 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 14 november 2007 - 22:39

ik heb de IEF uitgevoerd alleen mijn eiwitten crosslinken met elkaar waardoor ze niet naar hun pI kunnen lopen.
ik krijg ze ook niet "los" met 8M urea. Met SDS-PAGE kon ik een overmaat aan SDS in mijn sample buffer doen, maar dat gaat jammer genoeg niet met IEF doordat SDS de ladingen aantast op mijn eiwitten en dat wil ik nou juist niet.

Enig idee wat ik verder nog kan proberen?





0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures