Hoi allemaal,
Ik ben bezig met eiwitten te analyseren. Ik heb de eiwitten gezuiverd en gebruik gemaakt van freeze-drying om ze in poedervorm aan verschillende buffers te kunnen toevoegen voor verschillende analyse technieken.
De eiwitten zijn normaal gesproken in een lage aw waarde met ongeveer pH 5.
Ik wil IEF uitvoeren en de beste buffer om ze in op te lossen is MES buffer. Het probleem is dat ik nergens iets kan vinden over in welke concentratie MES ik het beste mijn eiwitten kan oplossen voor IEF.
Ik hoop dat iemand iets weet hierover en mij kan helpen of een goede link heeft waar ik meer informatie kan vinden.
Kim
Laatste berichten
-
08:29
Programmeren met vectoren 5
-
23:12
speciale rel. theorie 10
-
22:57
Straatklok loopt 5 minuten voor 11
-
22:57
wig 6
-
22:36
Gravity and gravitation 4
-
22:24
[scheikunde] vraag Chemie - wat is de oplossing? 10
-
19:47
Bruine vlekken op treinaanwijzerbord 10
-
19:44
Vogels in de stad zijn goede klussers 2
-
19:12
Rood laserlicht 3
-
17:30
Herleiden afmetingen vanaf een foto 21
-
16:34
[wiskunde] Prijs Product per KG; Alternatief Inzicht 3
-
13:57
do-re-mi-fa-so vliegtuigen 9
-
13:16
geen minkowski-ruimte toch? Doe ik dit nou fout? 17
-
13:12
[natuurkunde] kroon van koning op Syracuse 10
-
25 apr
2013 – Augustus Vraag 3 3
-
24 apr
Vraag 2009 Juli Vraag 5 5
-
24 apr
positie 2
-
24 apr
Schroefdraad berekening 8
-
24 apr
[scheikunde] Kan chloorgas de geleiding van elektriciteit belemmeren? 9
-
23 apr
Weerfrustratie 9
Nieuwsberichten
-
04 mar
Een nieuw soort magnetisme: altermagnetisme
-
31 okt
AI kan via stem diabetes vaststellen 11
-
21 okt
Einstein krijgt wéér gelijk 45
-
07 feb
witter dan wit 20
-
19 jun
irrigatie en de aardas
MES buffer voor eiwitten
Moderator: ArcherBarry
-
- Berichten: 2.399
Re: MES buffer voor eiwitten
Ik ben geen biochemie pro, maar als je een buffer rond de pKa kiest is 10 tot 50mM vaak al genoeg.
-
- Berichten: 3
Re: MES buffer voor eiwitten
ik heb de IEF uitgevoerd alleen mijn eiwitten crosslinken met elkaar waardoor ze niet naar hun pI kunnen lopen.
ik krijg ze ook niet "los" met 8M urea. Met SDS-PAGE kon ik een overmaat aan SDS in mijn sample buffer doen, maar dat gaat jammer genoeg niet met IEF doordat SDS de ladingen aantast op mijn eiwitten en dat wil ik nou juist niet.
Enig idee wat ik verder nog kan proberen?
ik krijg ze ook niet "los" met 8M urea. Met SDS-PAGE kon ik een overmaat aan SDS in mijn sample buffer doen, maar dat gaat jammer genoeg niet met IEF doordat SDS de ladingen aantast op mijn eiwitten en dat wil ik nou juist niet.
Enig idee wat ik verder nog kan proberen?
