Ik ben op zoek naar een artikel ivm vitamine B6 en B12 in plasma/urine, met welke spectrofotometrische techniek moet ik dit nagaan vit b6 enb 12 controleren in plasma/urine ? ik heb gevonden met een HPLC , klopt dit ? welke staalvoorbereiding is dan nodig? hoe ga ik dit aanpakken ? Ik heb ook een situatieschets van een halve pagina waarbij ik dus vitamine b6 en b12 zou moeten bepalen in urine/plasma, waarvoor is dit relevant ??
<table border='0' align='left' cellpadding='3' cellspacing='0'><tr><td padding='0' celspacing='0' align='left'><font size='1'># Moderatoropmerking</font></td></tr><tr><td id='moderator'><font size='1'>rwwh: Bedenk de volgende keer even een duidelijke titel. Titels als "vraag" of "project" zijn zo nikszeggend.</font></td></tr></table>
<div class='postcolor'>
Laatste berichten
-
13:57
Vraag 2009 Juli Vraag 5 3
-
12:51
positie 2
-
10:44
Schroefdraad berekening 8
-
00:15
[scheikunde] Kan chloorgas de geleiding van elektriciteit belemmeren? 9
-
21:15
Weerfrustratie 9
-
18:08
geen minkowski-ruimte toch? Doe ik dit nou fout? 15
-
23 apr
do-re-mi-fa-so vliegtuigen 7
-
23 apr
Kunnen quantum Zonnecellen 190% quantum efficiënt zijn 3
-
23 apr
De Euro Nederlandse 100 qubit computer komt eraan
-
23 apr
projectiel 8
-
23 apr
Verschil tussen deze 2 vragen 5
-
23 apr
[scheikunde] berekeningen labo vitamine c bepaling 1
-
22 apr
[wiskunde] rode en witte ballen verdelen 8
-
22 apr
Rotatie van het heelal 41
-
22 apr
Muntje opgooien 14
-
21 apr
Reactiviteit silyl enol ethers 1
-
21 apr
Criterium voor vochtretentie
-
21 apr
speciale rel. theorie 5
-
21 apr
Vogels in de stad zijn goede klussers
-
21 apr
Ervaringen met "herontdekkingen" 15
Nieuwsberichten
-
04 mar
Een nieuw soort magnetisme: altermagnetisme
-
31 okt
AI kan via stem diabetes vaststellen 11
-
21 okt
Einstein krijgt wéér gelijk 45
-
07 feb
witter dan wit 20
-
19 jun
irrigatie en de aardas
Vitamine B6 en B12
Moderator: ArcherBarry
-
- Berichten: 15
-
- Berichten: 71
Re: Vitamine B6 en B12
dank je wel voor de info, maar deze is weinig relevant voor de bespreking , toch bedankt !!
Re: Vitamine B6 en B12
Veel informatie over vitamines
http://www.homepages.hetnet.nl/~b1beukema/vitaminen.html
Aanvulling
Selecteren produkte in de menubalk
Selecteren HPLC-Applikationen
Selcteren Vitamin B6 (Pyridoxal-5-Phosphat)
Selecteren PDF Arbeitsanleitung
http://www.homepages.hetnet.nl/~b1beukema/vitaminen.html
Aanvulling
Selecteren produkte in de menubalk
Selecteren HPLC-Applikationen
Selcteren Vitamin B6 (Pyridoxal-5-Phosphat)
Selecteren PDF Arbeitsanleitung
-
- Berichten: 71
Re: Vitamine B6 en B12
Die info over vitamines had ik al gevonden maar nu is de vraag hoe ik vitamine B6 en B12 in plasma/urine ga bepalen , welke staalvoorbereiding is nodig ? en welke spectrofotometrische methode ga ik hier voor gebruiken, ik zal zoiezo de vitamines uit de urine moeten extraheren hoe moet ik dat doen ? ?
Re: Vitamine B6 en B12
Ik heb in de litteratuur zitten zoeken naar een spectrofotometrische methode maar eigelijk zie je allerlei technieken RIA,HPLC, ELISA in diverse varianten detectie zoals chemiluminisentie, fluorisentie, enz.
het enigste wat heb gevonden voor de B12 is dit artikel maar ik denk niet dat het werkt want het is nooit geciteerd.
INDIRECT SPECTROPHOTOMETRIC DETERMINATION OF VITAMIN-B12 USING 3-(2-PYRIDYL)-5,6-DIPHENYL-1,2,4-TRIAZINE-COBALT COMPLEX-FORMATION
Author(s): SAKAI T, OHNO N, SASAKI H
Source: BUNSEKI KAGAKU 40 (6): 305-308 JUN 1991
Taal Japans
Abstract: A sensitive spectrophotometric determination of vitamin B12 (V.B12) in complexing vitamin preparations is proposed. Since V.B12 contained cobalt, it is possible to use cobalt for the V.B12 assay. Cobalt reacts with 3-(2-pyridyl)-5,6-diphenyl-1,2,4-triazine (PDT) to form a cationic chelate ion and the complex can be extracted into 1,2-dichloroethane with tetrabromophenolphthalein ethyl ester (TBPE) at pH 9.0. The composition of the ternary complex is assumed to be Co(PDT)3(TBPE)2. A predetermined amount of V.B12 (0.1 approximately 3 mg) was heated at 200-degrees-C for 2 h with 20 ml of nitric acid. After adding 10 ml of nitric acid and 2 ml of perchloric acid, the mixture was evaporated to dryness. The residue was dissolved in 30 ml of 1 M hydrochloric acid by heating and diluted to 50 ml with distilled water. The required volume of the sample solution containing 0.5 approximately 2.5-mu-g cobalt (10 approximately 60-mu-g V.B12) was transferred to a 50-ml volumetric flask. To this, 1 ml of 10(-4) M potassium periodate, 2% Tiron, 7.5 X 10(-3) M PDT, 10 ml of the borate-phosphate buffer (pH 9), and 1 ml of 1.35 X 10(-3) M TBPE, were added. It was then diluted to 50 ml with distilled water. The mixture was transferred to a separatory funnel and shaken for 5 min with 10 ml of 1,2-dichloroethane. The organic phase was centrifuged and the absorbance was measured at 610 nm against a reagent blank. Molar absorptivity was 134000 mol-1 cm-1 l, and relative standard deviation, 1.7% for ten determinations of 30 ng ml-1 cobalt. Fe(II) was tolerated up to 0.1-mu-g ml-1 (5-fold for cobalt) by addition of 2 X 10(-6) M potassium periodate and 0.04% Tiron and also Cu(II), 0.1-mu-g ml-1 by adding 0.2 M thiourea. This method can be applied to the indirect assay of V.B12 compounds such as cianocobalamin, hydroxocobalamin and mecobalamin in commercial preparations containing other vitamins.
Voor de B6 geldt hetzelfde geen spectrofotometrische methode te vinden, je zult dus iets van een Elisa moeten gebruiken en de beschikkinh hebben over een fluoro- of chemoluminisentiemeter
het enigste wat heb gevonden voor de B12 is dit artikel maar ik denk niet dat het werkt want het is nooit geciteerd.
INDIRECT SPECTROPHOTOMETRIC DETERMINATION OF VITAMIN-B12 USING 3-(2-PYRIDYL)-5,6-DIPHENYL-1,2,4-TRIAZINE-COBALT COMPLEX-FORMATION
Author(s): SAKAI T, OHNO N, SASAKI H
Source: BUNSEKI KAGAKU 40 (6): 305-308 JUN 1991
Taal Japans
Abstract: A sensitive spectrophotometric determination of vitamin B12 (V.B12) in complexing vitamin preparations is proposed. Since V.B12 contained cobalt, it is possible to use cobalt for the V.B12 assay. Cobalt reacts with 3-(2-pyridyl)-5,6-diphenyl-1,2,4-triazine (PDT) to form a cationic chelate ion and the complex can be extracted into 1,2-dichloroethane with tetrabromophenolphthalein ethyl ester (TBPE) at pH 9.0. The composition of the ternary complex is assumed to be Co(PDT)3(TBPE)2. A predetermined amount of V.B12 (0.1 approximately 3 mg) was heated at 200-degrees-C for 2 h with 20 ml of nitric acid. After adding 10 ml of nitric acid and 2 ml of perchloric acid, the mixture was evaporated to dryness. The residue was dissolved in 30 ml of 1 M hydrochloric acid by heating and diluted to 50 ml with distilled water. The required volume of the sample solution containing 0.5 approximately 2.5-mu-g cobalt (10 approximately 60-mu-g V.B12) was transferred to a 50-ml volumetric flask. To this, 1 ml of 10(-4) M potassium periodate, 2% Tiron, 7.5 X 10(-3) M PDT, 10 ml of the borate-phosphate buffer (pH 9), and 1 ml of 1.35 X 10(-3) M TBPE, were added. It was then diluted to 50 ml with distilled water. The mixture was transferred to a separatory funnel and shaken for 5 min with 10 ml of 1,2-dichloroethane. The organic phase was centrifuged and the absorbance was measured at 610 nm against a reagent blank. Molar absorptivity was 134000 mol-1 cm-1 l, and relative standard deviation, 1.7% for ten determinations of 30 ng ml-1 cobalt. Fe(II) was tolerated up to 0.1-mu-g ml-1 (5-fold for cobalt) by addition of 2 X 10(-6) M potassium periodate and 0.04% Tiron and also Cu(II), 0.1-mu-g ml-1 by adding 0.2 M thiourea. This method can be applied to the indirect assay of V.B12 compounds such as cianocobalamin, hydroxocobalamin and mecobalamin in commercial preparations containing other vitamins.
Voor de B6 geldt hetzelfde geen spectrofotometrische methode te vinden, je zult dus iets van een Elisa moeten gebruiken en de beschikkinh hebben over een fluoro- of chemoluminisentiemeter
-
- Berichten: 71
Re: Vitamine B6 en B12
Bedankt voor de info en de tijd die je erinsteekt, maar ik denk dat ik een spectrofotometrische methode nodig heb om vitaminde b12 en b6 uit urine te halen , ik zal deze zoeizo eerst moeten extraheren en daarna moet ik denk ik HPLC gebruiken, dit heb ik in een artikel gevonden maar ik weet niet of het klopt ?
-
- Berichten: 71
Re: Vitamine B6 en B12
De bedoeling van de taak is dat ik zelf iets vind om vitamine b12 en b6 uit urine en of plasma te bepalen, de vragen zijn hoe doe ik dat ? Met welke spectrofotometrische methode ? Moet ik een voorbehandeling doen etc etc , ik moet daar artikels over vinden ....
Dit is de opdracht die ik gekregen heb.
Dit is de opdracht die ik gekregen heb.
-
- Berichten: 516
Re: Vitamine B6 en B12
HPLC lijkt mij op zich nog wel een goede oplossing. Nu moet je maar eens gaan kijken of je molecule polair of apolair is. Dan kan je toch net iets meer te weten komen over welk de mobiele en stationaire fase van de HPLC moet zijn.
Qua detector heb je dan (denk ik) maar weinig keuze, of een UV-detector of een DAD. Dat zijn beiden spectrofotometrische detectoren, maar dan moet je zeker weten bij welke golflengte de vitamines licht absoberen...
Nog wat opzoekwerk aan dus...
Qua detector heb je dan (denk ik) maar weinig keuze, of een UV-detector of een DAD. Dat zijn beiden spectrofotometrische detectoren, maar dan moet je zeker weten bij welke golflengte de vitamines licht absoberen...
Nog wat opzoekwerk aan dus...
-
- Berichten: 71
Re: Vitamine B6 en B12
volgens mij is vitamine b6 een base maar deze komt als zuur voor in de urine, dus mag ik ervan uit gaan dat t een zuur is ?
http://nl.wikipedia.org/wiki/Vitamine_B#Te...sche_gegevens_5
Ik dacht dat de meeste farmaca basisch zijn,maar ik weet niet hoe het in de urine voorkomt ?
http://nl.wikipedia.org/wiki/Vitamine_B#Te...sche_gegevens_5
Ik dacht dat de meeste farmaca basisch zijn,maar ik weet niet hoe het in de urine voorkomt ?
-
- Berichten: 71
Re: Vitamine B6 en B12
Hoe kan ik vitamine b 6 en b 12 uit urine extraheren ? komt vitamine b12 voor enkel in plasma voor en dus niet in urien ?
-
- Berichten: 11.177
Re: Vitamine B6 en B12
Waarom zou dat nodig zijn? Kun je het niet zo door een HPLC leiden?. De makkelijkste manier zal een standaardadditiemethode zijn.
-
- Berichten: 71
Re: Vitamine B6 en B12
dus ik voeg aan alle stalen gewoon een bekende concentratie vitamine b6 toe of bij de bepaling van vitamine b12 , bekende concentratie vitamine b6 ?
-
- Berichten: 11.177
Re: Vitamine B6 en B12
Eerst meten zonder de toevoeging (dit is tevens een "blanco"), en dan een lineaire ijklijn maken door bijvoorbeeld 5, 10, 15 en 20 mmol aan de stalen toe te voegen. Probeer hierbij wel zo goed mogelijk de pH van urine te behouden door de standaardopl te bufferen op de pH van urine.
