Springen naar inhoud

HPLC


  • Log in om te kunnen reageren

#1

royrsd

    royrsd


  • 0 - 25 berichten
  • 15 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 17 maart 2008 - 15:21

Heej, :twisted:

We zijn op school bezig met HPLC . Nou heb ik zo een blad met verschillende pieken maar hoe kan ik nou bepalen welke piek bij welke stof hoort??

mvg,

Roy 8-)

Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

Beryllium

    Beryllium


  • >5k berichten
  • 6314 berichten
  • Minicursusauteur

Geplaatst op 17 maart 2008 - 15:24

Da's best lastig!
HPLC is feitelijk een scheidingstechniek, maar als je wilt weten van een onbekend monster wat er in zit, zul je extra analyses moeten uitvoeren. Zonder voorkennis van wat er in je mengsel zit kun je niet zeggen wat een piek is.

Een voorbeeld is LC-MS, wat staat voor massaspectrometrie gekoppeld aan je (HP)LC.

Maar, stel dat je weet welke stoffen er in je mengsel zit, dan kun je aan de hand van je methode wel nagaan in welke volgorde ze worden gedetecteerd.
You can't possibly be a scientist if you mind people thinking that you're a fool. (Douglas Adams)

#3

Napoleon1981

    Napoleon1981


  • >1k berichten
  • 2399 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 17 maart 2008 - 16:41

Normaal gesproken doe je dit door pure standaarden te injecteren. Je krijgt dan 1 piek op een bepaald tijdstip, deze piek hoort dan bij een bepaalde stof.

#4

royrsd

    royrsd


  • 0 - 25 berichten
  • 15 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 18 maart 2008 - 11:20

Okee bedankt, :P
de hoeveelheden van de stoffen staan inderdaad op de standaarden aangegeven. Dus kan ik dan doormiddel van het percentage van de stof uit te rekenen en het percentage van het piekoppervlak van het totaal?

GRTZ,

:lol:

#5

Beryllium

    Beryllium


  • >5k berichten
  • 6314 berichten
  • Minicursusauteur

Geplaatst op 18 maart 2008 - 11:38

Hoe bedoel je?
Als in, '50 % is stof A, 30% is stof B en 20% is stof C, en aangezien de eerste piek 30% van de totale piekoppervlakte is, is de eerste piek van stof B'?

Dat is niet correct. Je hebt niet per se een gelijke verhouding tussen hoeveelheden verschillende stoffen en totale piekoppervlak. Wel is er meestal (afhankelijk van concentratie en detector) een relatie tussen de concentratie van stof A en het piekoppervlak van A.
You can't possibly be a scientist if you mind people thinking that you're a fool. (Douglas Adams)

#6

bteunissen

    bteunissen


  • >1k berichten
  • 1122 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 18 maart 2008 - 11:40

De concentratie/hoeveelheid stof is evenredig met de piekoppervlakte.

Een voorbeeld om te bepalen wat de concentratie van de te bepalen stof X is, is door een ijklijn te maken waarbij je de piekoppervlakte meet bij verschillende concentraties stof X. Vervolgens kun je de piekoppervlakte van je onbekende concentratie van stof X interpoleren op de ijklijn en de zo de concentratie bepalen.

gesnapt?

#7

Pink Panther

    Pink Panther


  • >250 berichten
  • 516 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 18 maart 2008 - 14:33

bij HPLC is er niet zomaar een onmiddelijk af te leiden evenredigheid tussen piekoppervlaktes en concentraties van verschillende stoffen in een mengsel.

Voorbeeld: een monster dat 50% A bevat en 20% B
je stuurt dat door een HPLC en dan krijg je twee pieken. Je kan nooit met zekerheid zeggen dat de grootste piek die van A is, en de kleinste die van B. Je bent immers niet zeker dat de detector een even grote gevoeligheid heeft voor de beide stoffen. De detector kan bijvoorbeel vťťl gevoeliger zijn voor B dan voor A, wat resulteert in een grotere B-piek.

Je kan bijvoorbeeld wťl op voorhand onderzoeken, aan de hand van enkele standaardreeksen wat de verkregen reactie is van elke stof op de detector. Maar in dat geval moet je al op voorhand weten welke stoffen in het monster zitten, en dat is niet altijd zo.

#8

bteunissen

    bteunissen


  • >1k berichten
  • 1122 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 18 maart 2008 - 16:54

bij HPLC is er niet zomaar een onmiddelijk af te leiden evenredigheid tussen piekoppervlaktes en concentraties van verschillende stoffen in een mengsel.

Daar doelde ik ook niet op. Je kunt de evenredigheid ook niet direct afleiden maar piekoppervlakte en concentratie zijn evenredig met elkaar. `Hoe¬ī kun je op verschillende manieren bepalen....

#9

Pink Panther

    Pink Panther


  • >250 berichten
  • 516 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 18 maart 2008 - 17:11

Daar doelde ik ook niet op. Je kunt de evenredigheid ook niet direct afleiden maar piekoppervlakte en concentratie zijn evenredig met elkaar. `Hoe¬ī kun je op verschillende manieren bepalen....

Oke, dan had ik het verkeerd begrepen. Excuses





0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures