Hey,
Wat me dwarszit: waarom was men de gel in de transferbuffer? Men moest die 2 keer wassen. Ook moesten we een roervlo in de buffertank steken. Waarom??
Hopelijk dat iemand me kan helpen.
Alvast bedankt
Laatste berichten
-
10:15
2013 – Augustus Vraag 3 3
-
09:54
Bruine vlekken op treinaanwijzerbord 6
-
23:07
Rood laserlicht 2
-
15:28
Vraag 2009 Juli Vraag 5 5
-
12:51
positie 2
-
24 apr
Schroefdraad berekening 8
-
24 apr
[scheikunde] Kan chloorgas de geleiding van elektriciteit belemmeren? 9
-
23 apr
Weerfrustratie 9
-
23 apr
geen minkowski-ruimte toch? Doe ik dit nou fout? 15
-
23 apr
do-re-mi-fa-so vliegtuigen 7
-
23 apr
Kunnen quantum Zonnecellen 190% quantum efficiënt zijn 3
-
23 apr
De Euro Nederlandse 100 qubit computer komt eraan
-
23 apr
projectiel 8
-
23 apr
Verschil tussen deze 2 vragen 5
-
23 apr
[scheikunde] berekeningen labo vitamine c bepaling 1
-
22 apr
[wiskunde] rode en witte ballen verdelen 8
-
22 apr
Rotatie van het heelal 41
-
22 apr
Muntje opgooien 14
-
21 apr
Reactiviteit silyl enol ethers 1
-
21 apr
Criterium voor vochtretentie
Nieuwsberichten
-
04 mar
Een nieuw soort magnetisme: altermagnetisme
-
31 okt
AI kan via stem diabetes vaststellen 11
-
21 okt
Einstein krijgt wéér gelijk 45
-
07 feb
witter dan wit 20
-
19 jun
irrigatie en de aardas
transfer buffer (blotting van eiwitten)
Moderator: ArcherBarry
Re: transfer buffer (blotting van eiwitten)
Ik denk dat je het hebt over elektroblotten na PAGE, geef dit alle informatie bij je vragen dat maakt het makkelijker om te helpen.
Waarom de gel gespoeld wordt weet ik niet, ik denk om electroforesebuffer te verwijderen om geen verschillende geleidende stukken in je gel te krijgen.
De roervlo dient om de buffer in beweging te houden om een goede en gelijkmatige warmteafvoer te verkrijgen
Waarom de gel gespoeld wordt weet ik niet, ik denk om electroforesebuffer te verwijderen om geen verschillende geleidende stukken in je gel te krijgen.
De roervlo dient om de buffer in beweging te houden om een goede en gelijkmatige warmteafvoer te verkrijgen
-
- Berichten: 211
Re: transfer buffer (blotting van eiwitten)
Eerst hebben we SDS-PAGE uitgevoerd dat we daarna gingen blotten.
gelsandwiche:
Waarvoor dient die spons en filtreerpapier? We moesten een sandwiche maken. Ik weet wel dat de we telkens met transferbuffer moesten bevochtigen. Ik dacht aan absorptie? Maar ben niet zeker
Wat bevat die nitrocellulosemembraan waardoor het blotten lukt?
Alvast bedankt
gelsandwiche:
Waarvoor dient die spons en filtreerpapier? We moesten een sandwiche maken. Ik weet wel dat de we telkens met transferbuffer moesten bevochtigen. Ik dacht aan absorptie? Maar ben niet zeker
Wat bevat die nitrocellulosemembraan waardoor het blotten lukt?
Alvast bedankt
Re: transfer buffer (blotting van eiwitten)
De spons en het filtreerpapier zijn een soort steunen om de gel voor inzakken te behoeden. Het bevochtigen gaat om de lucht uit het papier en de spons teverwijderen zodat er een een mooi egaal elektrisch veld onstaat om de eiwitten in dezelfde positie te houden.
Het membraam heeft zulke kleine porieen dat er geen eiwitten door heen kunnen en de eiwitten hechten zich op het oppervlak
Het membraam heeft zulke kleine porieen dat er geen eiwitten door heen kunnen en de eiwitten hechten zich op het oppervlak
-
- Berichten: 211
Re: transfer buffer (blotting van eiwitten)
Ah, ik begrijp het.
Nog 1 vraagje:
We moesten stalen laden. Daarvoor hebben we de gekleurde low range , ongekleurde low range, gekleurde high range, ongekleurde broad range en ongekleurde high range gebruikt. De onbekende staal was ovalbumine.
Waarvoor dienen die gekleurde en ongekleurde range? Ik heb een aantal bandjes gekregen, maar weet het MGW niet van de ongekleurde range + gekleurde range.
Kan iemand mij helpen?
Alvast bedankt
Nog 1 vraagje:
We moesten stalen laden. Daarvoor hebben we de gekleurde low range , ongekleurde low range, gekleurde high range, ongekleurde broad range en ongekleurde high range gebruikt. De onbekende staal was ovalbumine.
Waarvoor dienen die gekleurde en ongekleurde range? Ik heb een aantal bandjes gekregen, maar weet het MGW niet van de ongekleurde range + gekleurde range.
Kan iemand mij helpen?
Alvast bedankt
Re: transfer buffer (blotting van eiwitten)
Ik vermoed dat je het hebt over molecular weight markers waarmee je de grootte van je onbekende eiwitten kunt schatten.
Gekleurde markers zijn gemakkelijker in gebruik en je kunt de elektroforese goed volgen.
Welke range je gebruikt hangt af van welke gel je hebt gemaakt om optimaal de grootte te kunnen schatten.
Misschien kun je de waarden van de markers achterhalen als je de leverancier kent, ze staan bijna altijd op de website.
Gekleurde markers zijn gemakkelijker in gebruik en je kunt de elektroforese goed volgen.
Welke range je gebruikt hangt af van welke gel je hebt gemaakt om optimaal de grootte te kunnen schatten.
Misschien kun je de waarden van de markers achterhalen als je de leverancier kent, ze staan bijna altijd op de website.
Re: transfer buffer (blotting van eiwitten)
Hoe kleiner de te scheiden eiwitten des te hoger het percentage.
Maar wat heeft het van doen met je MWMérs
Maar wat heeft het van doen met je MWMérs
-
- Berichten: 211
Re: transfer buffer (blotting van eiwitten)
Men moet de onbekende staal via de ongekleurde low range en ongekleurde high range bepalen.
Via de ijklijnmethode: moet men 45KDa voor ovalbumine bekomen.
Maar mijn waarden wijken af van die 45 KDa.
Hoe komt dat?
Via de ijklijnmethode: moet men 45KDa voor ovalbumine bekomen.
Maar mijn waarden wijken af van die 45 KDa.
Hoe komt dat?
Re: transfer buffer (blotting van eiwitten)
Ik beschouw de markers als een indicator voor de grootte omdat zelfs al heb je perfect je eiwitten gedenatureerd en van SDS voorzien dan nog blijven er kleine verschillen in vorm waardoor er kleine verschillen in loopafstand ontstaan.
De ijklijnmethode is aardig maar in mijn opinie suggereert ze een mate van betrouwbaarheid die niet waar te maken is, in ieder geval bij mij niet er blijven verschillen tussen de waarden die ik vindt en de bekende grootte van eiwitten.
De ijklijnmethode is aardig maar in mijn opinie suggereert ze een mate van betrouwbaarheid die niet waar te maken is, in ieder geval bij mij niet er blijven verschillen tussen de waarden die ik vindt en de bekende grootte van eiwitten.
