Springen naar inhoud

HPLC


  • Log in om te kunnen reageren

#1

truepako

    truepako


  • >25 berichten
  • 79 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 26 mei 2009 - 05:51

Goedendag iedereen,

Voor mijn practica ga ik werken met de HPLC. De kolom die ik heb is een reversed phase C18 kolom (de afmetingen weet ik niet).

Ik wil dus weten hoeveel ik van me component ik maximaal kan injecteren. Dit wil ik weten zodat ik de kolom niet overstuur hoef te maken. En zijn er ook bronnen waarbij deze waarden zijn weergeven?

Alvast bedankt!

Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

truepako

    truepako


  • >25 berichten
  • 79 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 26 mei 2009 - 05:53

O ja. Ik wil ook weten wat de detectiegrenzen van de kolom is.

#3

PieTerDeBooMHuTBeWoNeR

    PieTerDeBooMHuTBeWoNeR


  • >25 berichten
  • 55 berichten
  • Gebruiker

Geplaatst op 26 mei 2009 - 07:52

Bij de injectie van je staal maakt het volume niet zoveel uit... Je injecteerd je staal eerst in een loop die waarna je er eluens laat door stromen. Bij ons zijn die loop's goed voor 20ĶL. (hangt gewoon aan een stickertje aan de loop zelf) Als je dus 50ĶL injecteerd zal er 30ĶL gewoon uitstromen in een klein afvalbekertje en 20ĶL zal naar de kolom gaan.

Hierdoor heb je dus steeds hetzelfde volume geÔnjectreerd in je kolom wat dus vrij reproduceerbare resultaten oplevert..


Voor de detectiegrenzen nemen wij drie keer de ruis en dan reken wij om naar de concentratie voor die bepaalde component.

Ik hoop dat je er wat aan hebt.
ciao

#4

FrankB

    FrankB


  • >250 berichten
  • 281 berichten

Geplaatst op 26 mei 2009 - 09:15

Het hangt vooral van je detector en te meten monster af, maar meestal meet je concentraties in mg/l (bijv. tussen 1 en 10 mg/L). Maar om zeker te zijn, kan je het eerst experimenteel bepalen door te kijken wat voor resultaat een bepaalde concentratie geeft. Of bijv. een reeks maken.

Edit: Voor injectievolume hanteren wij meestal de volgende vuistregels:
Als het oplosmiddel van het monster een grotere elutiekracht heeft dan de mobiele fase: 10-15 μL;
Als het oplosmiddel van het monster een kleinere elutiekracht heeft dan de mobiele fase: Vrijwel geen limieten
Of bij mobiele fase als oplosmiddel: Injecteer niet meer dan 1/6e van je piekvolume;
Of: Injecteer niet meer dan 10% van het kolomvolume.

Bron: Kromidas: Practical problem solving in HPLC

Veranderd door FrankB, 26 mei 2009 - 09:22






0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures