Primers ontwikkelen

Moderator: ArcherBarry

Forumregels
(Middelbare) school-achtige vragen naar het forum "Huiswerk en Practica" a.u.b.
Zie eerst de Huiswerkbijsluiter
Reageer
Berichten: 38

Primers ontwikkelen

Hallo allemaal,

weet iemand misschien,Hoe kan ik een primers ontwikelen?

primers te ontwikkelen voor exon 10 en exon 14 (van gen TP63) en 'in frame' in pGEX gezet worden,

Kunnen jullie me helpen?

Berichten: 42

Re: Primers ontwikkelen

Hmmm, primer worden door DNA primase geproduseert.

http://nl.wikipedia.org/wiki/DNA_primase

Mischien zal het helpen.

Berichten: 740

Re: Primers ontwikkelen

@R2D2

Dat is niet helemaal de vraag die life heeft.

Kan je de sequenties van beide exons geven?

Allereerst moet je de volgende dingen uitzoeken

- welke restrictie sites wil je gebruiken, deze moeten uniek zijn, dus niet in de exonen knippen en tevens moeten ze aanwezig zijn in je cloning site van de vector. Daarnaast is het makkelijk als ze beide een beetje "compatibal" zijn tijdens een digestie en uiteraard moeten ze op het lab aanwezig zijn.

- waat haal je je DNA vandaan? Heb je een pool genomisch DNA waarop je gaat PCR'en of heb je de exonen in een andere vector zitten? Dit maakt uit voor het ontwerpen van je primers. Als je PCR'ed op een vector, dan kan je meestal hele simpele primers gebruiken.

Reageer