Springen naar inhoud

Probleem ELISA


  • Log in om te kunnen reageren

#1

Markk_CF

    Markk_CF


  • 0 - 25 berichten
  • 2 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 05 januari 2010 - 17:29

Hallo, wij hebben met behulp van ELISA de concentratie van insuline in 2 serum monsters proberen te bepalen, aan de hand van een ijklijn (standaard van 50U/ml).
HIeronder volgen mijn resultaten..
Weet iemand wat er verkeerd zou kunnen gegaan zijn?
Alvast bedankt

Geplaatste afbeelding
www.ScienceJapan.com

Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

*_gast_Gerard_*

  • Gast

Geplaatst op 05 januari 2010 - 19:26

Alleen met de getallen is het moeilijk te bepalen wat de problemen zijn, als je in een volgende post het protocol kunt geven kunnen we misschien beter beoordelen wat er fout kan zijn.
De serum monsters zijn resp A1-B12 en C1-D12, de standaard E1-F12 dus in 24-voud?
Blanco G1-G12,H7-H12 en de controles H1-H3 en H4-H6?

Opmerking 1.
Bij een ELISA kun je niet werken met een een punts calibratie omdat er geen liniaire relatie is tussen concentratie en extinctie.
Gezien de controles lijkt het erop dat de standaard verkeerd is behandeld, of alleen een sterke verdunning gebruikt is, kijkend naar de waarden voor de controles moet de hoogste standaard minimaal 20 maal hoger zijn.

Veranderd door Gerard, 05 januari 2010 - 19:27


#3

Markk_CF

    Markk_CF


  • 0 - 25 berichten
  • 2 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 07 januari 2010 - 18:57

Ja er is iets goed mis;)
heb je geen protocol voor nodig..
want A1 - A12 is een verdunning,, steeds 100ul overpipetteren. dus 1 op 1!

Maar we zijn er zeker van dat dit goed gegaan is, meer hebben zo'n resultaat.
Dus wat de reden hiervoor kan zijn?

Na een nieuwe ELISA, zijn beide controles hoog, en loopt de extinctie van het monster op:S! Lijkt mij ook onverklaarbaar!
www.ScienceJapan.com

#4

*_gast_Gerard_*

  • Gast

Geplaatst op 07 januari 2010 - 22:02

Markk, ik weet niet of je ervaring met elisa's hebt maar je zult echt het gehele protocol wat je gebruikt moeten posten anders is er echt niets zinnigs over te zeggen.
Je kunt je niet voorstellen wat er bij een ELISA allemaal mis kan gaan, wij zetten wel eens elisa's op en de problemen zijn soms grenzeloos.
Als je een verdunning hebt en de resultaten lopen op in plaats van elke keer te halveren dan meet je wat anders dan je analyt, misschien wel je verdunningsvloeistof want die concentratie neemt toe.





0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures