Springen naar inhoud

Kweken Bacterie


  • Log in om te kunnen reageren

#1

Epyon

    Epyon


  • >25 berichten
  • 39 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 22 februari 2010 - 14:13

Hallo,

Ik had een vraag over het kweken van Heliobacteria (Helio. mobilis).
Ik moet deze cellen labelen met 15N. Dus om deze reden mag het medium waarin ik het laat groeien niet te veel bronnen van stikstof bevatten, want dit geeft problemen met verder onderzoek hierop. Tot zo ver kom ik alleen maar medium's tegen die "Yeast" bevatten maar omdat dit dus ook stikstof bevat kan ik deze media niet gebruiken.
Ik heb 1 medium gevonden, maar ze groeien hier relatief traag in. 1 oplossing zou zijn, denk ik, om de concentraties van the stoffen die in het medium zitten te verhogen.
Ik zou graag willen weten of jullie ideeen hebben die ik zou kunnen proberen.

Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

ArcherBarry

    ArcherBarry


  • >1k berichten
  • 3324 berichten
  • Moderator

Geplaatst op 23 februari 2010 - 09:47

Hoi Epyon en welkom op het forum

Waarom niet een gewoon medium nemen en dan voortijdig (na voldoende ontwikkeld te zijn) de platen uit de broedstoof halen en in een koelkast/vriezer plaatsen om de ontwikkeling te stoppen.

Veranderd door ArcherBarry, 23 februari 2010 - 09:48

Niet geschoten is altijd mis, en te snel schieten vaak ook.

 

Pas op! Chocolade kan je kleding laten krimpen!


#3

Epyon

    Epyon


  • >25 berichten
  • 39 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 23 februari 2010 - 13:31

Maar als ik een normaal medium gebruik dan zitten er meerdere stikstof bronnen in dus krijg ik dan niet het probleem dat de H. mobilis niet 15N gelabeld is? of alleen maar een klein gedeelte gelabeld is.

#4

Colombo_inc2

    Colombo_inc2


  • 0 - 25 berichten
  • 13 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 28 februari 2010 - 21:29

Hi Epyon,

Het is moeilijk om een medium te vinden waarin alle stikstof 15N is. Begrijp dat het heel duur is deze zeldzame 15N stikstof bronnen te maken.
Het labelen van bacteriŽn (of andere cellen) met 'zware' isotopen (15N, 14C, etc.) wordt ook gebruikt voor massaspectrometrie (SILAC: 'Stable Isotope Labeling With Amino Acids').
Hierbij maakt men gebruik van het feit dat niet alle aminozuren door een organisme zelf kunnen worden gemaakt (of modificeren het organisme). Je kunt zelf gaan zoeken welke aminozuren H. mobilis niet zelf kan aanmaken (essentiŽle aminozuren).

Het medium kunt je zelf maken door alle essentiŽle aminozuren te bestellen en hier je gelabeld isotoop aan toevoegen. Denk ook na of het erg is als dit aminozuur weer wordt verbouwt tot een ander aminozuur (naast arginine ook proline wordt gevormd bijvoorbeeld, wat bij massaspectrometrie ongunstig is).

Overigens is deze methode zo populair dat grote bedrijven aanbieden je medium naar wens samen te stellen.

Succes,

TK

Veranderd door Colombo_inc2, 28 februari 2010 - 21:29


#5

Epyon

    Epyon


  • >25 berichten
  • 39 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 01 maart 2010 - 14:23

Bedankt voor je reactie, de reden waarom ik ze wil labelen is vanwege een bepaald experiment met de vaste stof 15N-NMR.
Ik had al een medium getest die werdt genoemd in een artikel dat ik gelezen had maar helaas zonder succes. Ik ben zelf niet echt bekent met bacterien etc, maar het is een onderdeel van mijn opdracht :P





0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures