Piekoppervlak blijft toenemen?
Moderator: ArcherBarry
-
- Berichten: 31
Piekoppervlak blijft toenemen?
Hallo allemaal.
Ik zit met een probleem.
Ik ben een methode aan het opzetten om luteine, zeaxanthine en echinone te meten op een LC-MS. We gebruiken een Accela LC en een Thermo TSQ Vantage (triple quad) als MS.
We gebruiken 2 mengels als eluens.
Eluens A: (methyl-tertbutylether:MeOH:H2O) 8:90:2
Eluens B: (methyl-tertbutylether:MeOH:H2O) 82:16:2
Beide oplossingen bevatten 1uM ammoniumacetaat.
Er zijn verschillende methoden gebruikt en bij alle methodes komen de volgende problemen voor.
De retentietijden van de componenten blijft wisselen.
De piekoppervlakten zijn niet stabiel en constant, ze beginnen laag en nemen dan toe. Na een aantal runs blijft het wel constanter maar het blijft schommelen.
Iemand enig idee wat dit kan veroorzaken.
We hebben al vanalles geprobeerd maar het probleem blijft zich voordoen.
Ik zit met een probleem.
Ik ben een methode aan het opzetten om luteine, zeaxanthine en echinone te meten op een LC-MS. We gebruiken een Accela LC en een Thermo TSQ Vantage (triple quad) als MS.
We gebruiken 2 mengels als eluens.
Eluens A: (methyl-tertbutylether:MeOH:H2O) 8:90:2
Eluens B: (methyl-tertbutylether:MeOH:H2O) 82:16:2
Beide oplossingen bevatten 1uM ammoniumacetaat.
Er zijn verschillende methoden gebruikt en bij alle methodes komen de volgende problemen voor.
De retentietijden van de componenten blijft wisselen.
De piekoppervlakten zijn niet stabiel en constant, ze beginnen laag en nemen dan toe. Na een aantal runs blijft het wel constanter maar het blijft schommelen.
Iemand enig idee wat dit kan veroorzaken.
We hebben al vanalles geprobeerd maar het probleem blijft zich voordoen.
-
- Berichten: 677
Re: Piekoppervlak blijft toenemen?
Welke kolom gebruik je?
Indien ja, dan is die concentratie veel te laag, zou min 20 mM moeten zijn.
Is dat 1 µM?Beide oplossingen bevatten 1uM ammoniumacetaat
Indien ja, dan is die concentratie veel te laag, zou min 20 mM moeten zijn.
-
- Berichten: 31
Re: Piekoppervlak blijft toenemen?
Lol ik weet niet hoe ik erbij kom.
Maar het is 10 mM
Maar het is 10 mM
-
- Berichten: 31
Re: Piekoppervlak blijft toenemen?
YMC-Pack C30 Kolom
250 x 4.6 mm i.d.
S-3um
De kolom is idd iets waar ik ook al aan twijfelde.
Het is een behoorlijk lange kolom. Maar volgens de mensen waar ik het voor uitvoer is dit een van de enige goeie kolommen ervoor.
Een kortere kolom zal luteine en zeaxanthine minder kunnen scheiden.
250 x 4.6 mm i.d.
S-3um
De kolom is idd iets waar ik ook al aan twijfelde.
Het is een behoorlijk lange kolom. Maar volgens de mensen waar ik het voor uitvoer is dit een van de enige goeie kolommen ervoor.
Een kortere kolom zal luteine en zeaxanthine minder kunnen scheiden.