HPLC dode tijd

Moderator: ArcherBarry

Reageer
Berichten: 2

HPLC dode tijd

Hallo,

Ik had de opdracht om vanuit verschillende eluenssamenstellingen de retentie tijd, netto RT en retentie factor te berekenen.

Nu heb ik samenstellingen van 90/10 tot 50/50 Methanol/Water gebruikt. Bij elke grafiek kwam er echter 1 piek uit. Hoe valt er hieruit de retentie tijd & dode tijd te halen?

Zelf heb ik het vermoede dat het kort om fout is uitgevoerd en dat er 2 pieken horen te verschijnen

Kan iemand mij hier verder mee helpen?

Hier even een kleine voorbeeld van wat er uit kwam:

Afbeelding

Berichten: 677

Re: HPLC dode tijd

Je kan de dode tijd bij HPLC experimenteel bepalen op verschillende manieren. Het eenvoudigste is het chromatograferen van uracil (wat jij blijkbaar gedaan hebt). Dit een dermate polaire verbinding, dat ze nagenoeg niet weerhouden wordt op een C18 kolom. Je stelt dan de dode tijd of mobiele fase tijd tm gelijk aan de retentietijd tR van uracil. (tR is de tijd tussen de injectie en het piekmaximum)

De netto retentietijd tR' van uracil is dan (per definitie) gelijk aan 0.

De retentiefactor k is ook per definitie 0

Reageer