Hoi allemaal,
Ik heb een praktijkles uitgevoerd betreft het trainen met de HPLC.
De praktijk verliep soepel, maar nu stuit ik toch op enkele problemen en hoop dat jullie me er mee kunnen helpen.
Ik heb met het volgende monster gewerkt:
- Ethylfenol, tolueen en ethylbenzeen opgelost in methanol.
Hierbij heb ik gelijk een vraag. Na het injecteren van het mengsel krijg je drie pieken en ik heb ze geïdentificeerd op molecuulgrootte.
Dus ik zou zeggen dat de volgorde: tolueen - ethylbenzeen - ethylfenol is.
Maar iets daarbij zit me niet lekker. Ik zou graag willen weten of dit klopt.
Later kom ik bij een vraag betreft de resolutie en resolutiefactor. Zoals ik het lees neem ik aan dat ze hetzelfde zijn:
het controleren van de piekscheiding. Er wordt mij gezegd dat er wel degelijk een verschil is. Mocht iemand hints voor mij hebben, graag.
Dit waren mijn vragen, een hoop tekst, maar hoop dat het duidelijk is.
Met vriendelijke groet,
Laatste berichten
-
18:08
Aardlek-schakelaar
-
16:45
wig 8
-
15:56
Programmeren met vectoren 6
-
14:53
Straatklok loopt 5 minuten voor 12
-
23:12
speciale rel. theorie 10
-
22:36
Gravity and gravitation 4
-
22:24
[scheikunde] vraag Chemie - wat is de oplossing? 10
-
19:47
Bruine vlekken op treinaanwijzerbord 10
-
19:44
Vogels in de stad zijn goede klussers 2
-
19:12
Rood laserlicht 3
-
25 apr
Herleiden afmetingen vanaf een foto 21
-
25 apr
[wiskunde] Prijs Product per KG; Alternatief Inzicht 3
-
25 apr
do-re-mi-fa-so vliegtuigen 9
-
25 apr
geen minkowski-ruimte toch? Doe ik dit nou fout? 17
-
25 apr
[natuurkunde] kroon van koning op Syracuse 10
-
25 apr
2013 – Augustus Vraag 3 3
-
24 apr
Vraag 2009 Juli Vraag 5 5
-
24 apr
positie 2
-
24 apr
Schroefdraad berekening 8
-
24 apr
[scheikunde] Kan chloorgas de geleiding van elektriciteit belemmeren? 9
Nieuwsberichten
-
04 mar
Een nieuw soort magnetisme: altermagnetisme
-
31 okt
AI kan via stem diabetes vaststellen 11
-
21 okt
Einstein krijgt wéér gelijk 45
-
07 feb
witter dan wit 20
-
19 jun
irrigatie en de aardas
[scheikunde] Scheiden v componenten mbv de HPLC
Moderators: ArcherBarry, Fuzzwood
-
- Berichten: 6.853
Re: [scheikunde] Scheiden v componenten mbv de HPLC
Hoe heb je op molecuulgrootte geselecteerd?
De terminologie is een beetje weggezakt, maar is resolutie niet gewoon een verschil (dus een tijd), en resolutiefactor een eenheidsloze verhouding?
De terminologie is een beetje weggezakt, maar is resolutie niet gewoon een verschil (dus een tijd), en resolutiefactor een eenheidsloze verhouding?
-
- Berichten: 4
Re: [scheikunde] Scheiden v componenten mbv de HPLC
Bedankt voor het snel reageren.
Ik heb de molecuulgrootte geselecteerd op basis van het aantal C'tjes (koolstof atomen). Dus tolueen: C7H8, ethylbenzeen C8H10 en ethylfenol C8H10O.
Dit is op het moment het enige waar ik het van af kan leiden.
En het deel over de resolutiefactor. Ik weet dat de resolutie een verhouding tussen twee pieken is en geen eenheid heeft.
Maar er werd mij de opdracht gegeven om de resolutie en resolutiefactor uit te rekenen.
En hoe ik het interpreteer lijkt mij dit twee synoniemen van elkaar.
Met vriendelijke groet,
Ik heb de molecuulgrootte geselecteerd op basis van het aantal C'tjes (koolstof atomen). Dus tolueen: C7H8, ethylbenzeen C8H10 en ethylfenol C8H10O.
Dit is op het moment het enige waar ik het van af kan leiden.
En het deel over de resolutiefactor. Ik weet dat de resolutie een verhouding tussen twee pieken is en geen eenheid heeft.
Maar er werd mij de opdracht gegeven om de resolutie en resolutiefactor uit te rekenen.
En hoe ik het interpreteer lijkt mij dit twee synoniemen van elkaar.
Met vriendelijke groet,
-
- Berichten: 677
Re: [scheikunde] Scheiden v componenten mbv de HPLC
Als ik aanneem dat je de scheiding op een klassieke, C18 kolom hebt uitgevoerd, dan is de elutievolgorde niet zozeer volgens moleculaire grootte, maar wel volgens polariteit: De meest polaire verbinding lijkt het meest op de polaire mobiele fase, en zal dus het snelst de kolom verlaten. De minst polaire verbinding zal dus de grootstse retentietijd hebben.
De resolutiefactor is een term die normaal niet meer gebruikt wordt, maar vervangen is door "Resolutie", symbool Rs. Dit wordt gedefinieerd als:
Rs = (tR2 - tR1)/w
Waarbij tRi de retentietijden zijn van pieken 1 resp. 2 ; en w de breedte van één piek, gemeten op de basislijn.
De meeste chromatografiesoftware kan Rs rechtstreeks bepalen, maar je kan dat uiteraard ook meten op het chromatogram. Let er wel op dat alles in dezelfde eenheden is (sec of min of mm op het papier).
Twee pieken die net gescheiden zijn tot op de basislijn, hebben Rs = 1,5.
De resolutiefactor is een term die normaal niet meer gebruikt wordt, maar vervangen is door "Resolutie", symbool Rs. Dit wordt gedefinieerd als:
Rs = (tR2 - tR1)/w
Waarbij tRi de retentietijden zijn van pieken 1 resp. 2 ; en w de breedte van één piek, gemeten op de basislijn.
De meeste chromatografiesoftware kan Rs rechtstreeks bepalen, maar je kan dat uiteraard ook meten op het chromatogram. Let er wel op dat alles in dezelfde eenheden is (sec of min of mm op het papier).
Twee pieken die net gescheiden zijn tot op de basislijn, hebben Rs = 1,5.
-
- Berichten: 4
Re: [scheikunde] Scheiden v componenten mbv de HPLC
Bedankt voor de informatie Jooken!
Alleen komt er nu een nieuwe vraag: Is er een boek/site waar ik de polariteit van mijn componenten kan vinden?
Met vriendelijke groet,
Alleen komt er nu een nieuwe vraag: Is er een boek/site waar ik de polariteit van mijn componenten kan vinden?
Met vriendelijke groet,
-
- Berichten: 677
Re: [scheikunde] Scheiden v componenten mbv de HPLC
Het begrip "polariteit" wordt door IUPAC als volgt gedefinieerd (Zie het IUPAC Gold Book)
Met ander woorden, het is niet mogelijk om de polariteit van een molecule precies te definiëren, en evenmin mogelijk om de polariteit te berekenen. Behalve in eenvoudige gevallen, waarbij de verschillende moleculen vergelijkbaar zijn, is het ook niet mogelijk om de elutievolgorde exact te voorspellen. Soms volstaat het bijvoorbeeld om het gehalte aan methanol in het eluent te verhogen of te verlagen om een andere elutievolgorde te krijgen bij sommige pieken.
Hoe kan je nu toch tewerk gaan om een idee te krijgen van de relatieve polariteit?
Ik gebruik de volgende vuistregel (bedenk wel dat in de chemie op elke vuistregel minstens één uitzindering bestaat, zelfs op deze vuistregel)
- baken een zo groot mogelijk deel van de structuur af dat gemeenschappelijk is voor al je moleculen.
In jouw geval gaat het over ethylfenol, tolueen en ethylbenzeen. Het gemeenschappelijke deel is C6H5-CH2-
- kijk nu of er op dit gemeenschappelijke deel polaire of apolaire substituenten staan.
Ethylbenzeen is uiteraard minder polair dan tolueen, want ethylbenzeen heeft een CH3-groep meer dan tolueen en deze groep is apolair (geen bijzondere intermoleculaire interacties, dipoolmoment zo goed als nul).
ethylfenol heeft echter een polaire OH-groep (dipoolmoment, waterstofbruggen, ...) en is dus meer polair dan ethylbenzeen, en uiteaard ook dan tolueen. De CH3-groep dat ethylbenzeen meer heeft dan tolueen kan op zich niet zo een sterke intermoleculaire interacties aangaan.
Ik zou dus zeggen dat eerst ethylfenol elueert, dan tolueen en dan ethylbenzeen.
Nogmaals: wees altijd voorzichtig met het voorspellen van elutievolgorden! Verifieer indien mogelijk altijd met zuivere standaarden.
(Let op de cursivering!)"When applied to solvents, this rather ill-defined term covers their overall solvation capability (solvation power) for solutes [â¦], which in turn depends on the action of all possible, nonspecific and specific, intermolecular interactions between solute ions or molecules and solvent molecules, [â¦]â
Met ander woorden, het is niet mogelijk om de polariteit van een molecule precies te definiëren, en evenmin mogelijk om de polariteit te berekenen. Behalve in eenvoudige gevallen, waarbij de verschillende moleculen vergelijkbaar zijn, is het ook niet mogelijk om de elutievolgorde exact te voorspellen. Soms volstaat het bijvoorbeeld om het gehalte aan methanol in het eluent te verhogen of te verlagen om een andere elutievolgorde te krijgen bij sommige pieken.
Hoe kan je nu toch tewerk gaan om een idee te krijgen van de relatieve polariteit?
Ik gebruik de volgende vuistregel (bedenk wel dat in de chemie op elke vuistregel minstens één uitzindering bestaat, zelfs op deze vuistregel)
- baken een zo groot mogelijk deel van de structuur af dat gemeenschappelijk is voor al je moleculen.
In jouw geval gaat het over ethylfenol, tolueen en ethylbenzeen. Het gemeenschappelijke deel is C6H5-CH2-
- kijk nu of er op dit gemeenschappelijke deel polaire of apolaire substituenten staan.
Ethylbenzeen is uiteraard minder polair dan tolueen, want ethylbenzeen heeft een CH3-groep meer dan tolueen en deze groep is apolair (geen bijzondere intermoleculaire interacties, dipoolmoment zo goed als nul).
ethylfenol heeft echter een polaire OH-groep (dipoolmoment, waterstofbruggen, ...) en is dus meer polair dan ethylbenzeen, en uiteaard ook dan tolueen. De CH3-groep dat ethylbenzeen meer heeft dan tolueen kan op zich niet zo een sterke intermoleculaire interacties aangaan.
Ik zou dus zeggen dat eerst ethylfenol elueert, dan tolueen en dan ethylbenzeen.
Nogmaals: wees altijd voorzichtig met het voorspellen van elutievolgorden! Verifieer indien mogelijk altijd met zuivere standaarden.
-
- Berichten: 4
Re: [scheikunde] Scheiden v componenten mbv de HPLC
Bedankt voor deze nuttige informatie!
Ik ga hier zeker nog veel profijt van hebben.
Nogmaals bedankt!
Ik ga hier zeker nog veel profijt van hebben.
Nogmaals bedankt!
