Wetenschapsforum

Hoi allemaal,

Ik moet volgende periode een eigen analytisch onderzoek doen. Hierbij wilde ik graag het gehalte ibuprofen bepalen in pijnstillers met de volgende technieken: UV-VIS, HPLC en GC/MS.

Met de GC/MS heb ik zelf nog nooit gewerkt, wel theorie les over gehad en het lijkt me erg interessant om daar is mee te werken.

Van te voren wilde ik gebruik maken van SPE als monster voorbewerkingsstap.

Nu had ik een aantal vraagjes:

- Waarmee kan ik de ibuprofen kleuren om het gehalte te meten met de UV/VIS?

- Watvoor eluens kan ik het beste gebruiken bij de HPLC?

- En welk oplosmiddel kan ik het beste gebruiken bij GC/MS, gewoon methanol?

Als jullie nog andere manieren hebben om het gehalte te bepalen of aanvullingen dan hoor ik dat graag!

Alvast bedankt voor de moeite,

Intercity

EDIT: Ik kwam net denk ik een goede HPLC methode tegen op internet: http://www.phenomenex.com/Application/Deta...lication/Search

Hierbij staat bij de voorbewerkingsstap ook SPE. Hier wordt alleen gedroogd met Hg, op het SPE voorschrift, die ik over twee weken ga uitvoeren, dat je moet drogen met stikstof. Nu was mijn vraag wat precies de functie van het drogen is bij de SPE, dit is mij niet helemaal duidelijk.

Dus de vraag is dan kan ik de SPE methode als volgt uitvoeren:

Methanol en water door het kraantje laten lopen, monster erdoor, drogen aan de lucht, dichloormethaan op kolom brengen, dichloormethaan afdampen met stikstofstroom, monster oplossen voor hplc.

Alvast bedankt,

Ibuprofen heeft een pi-systeem en zal dus in het UV-gebied zonder meer kleuren.

Oke, dan hoef ik dus niets toe te voegen om het te meten met de UV/VIS? Of bedoelde je dat niet?

EDIT: Het duurde even maar ik snap al wat je bedoeld, bedankt!

Even verduidelijken, ik bedoelde dus absorberen. Je hoeft dus inderdaad niets toe te voegen. Alleen indien gewenst kijken waar het absorptiemaximum ligt.

Ja, dat had ik er inderdaad uit begrepen! Bedankt!

De vraag van de GC/MS ben ik al achter gekomen. Ik vraag me alleen nog af of ik de SPE methode met het afdampen met stikstof kan gebruiken ipv afdampen met kwik.

Ik hoop dat iemand me daar nog mee zou kunnen helpen.

Alvast bedankt,

afdampen met kwik

Hier wordt bedoeld: drogen bij een druk van 10" kwik. Dat is dus 25 cm kwikdruk.

Oke, bedankt!

Nog een vraagje, is er een formule om te berekenen hoe je een buffer moet maken.

Ik heb voor een analyse een 20mM Potassium phosphate, pH 3.0 nodig. Hoe kan ik berekenen hoe ik dat kan maken?

Alvast bedankt,

Buffers kan je uitrekenen met de formule van Henderson-Hasselbach.

De zure component in jouw geval is H₃PO₄ en de basische NaH₂PO₄. Je moet in elk geval de pH controleren met een pH-meter. Bufferformules (of: pH formules in het algemeen) houden geen rekening met de temperatuur of de ionische sterkte, en zijn dus maar benaderend.

Overigens, als je ibuprofen met GC wil bepalen, dan ga je moeten derivatiseren. Het carbonzuur zal anders te weinig vluchtig zijn.

SPE heb je eigenlijk alleen nodig wanneer:

- een opkuis van je monster noodzakelijk is (= verwijdering van interfererende componenten)

EN/OF

- het concentreren van je analyt noodzakelijk is (omdat je anders beneden de detectielimiet zit)

Ik zou de procedure niet ingewikkelder maken dan nodig.

Als je ibuprofen moet bepalen in een farmaceutisch preparaat, volstaat meestal een extractie met methanol om het excipiens kwijt te raken. Het extract ga je dan allicht nog moeten verdunnen voor de HPLC analyse.

"Nog een vraagje, is er een formule om te berekenen hoe je een buffer moet maken"

Voor luie mensen kan het ook zo

http://home.fuse.net/clymer/buffers/phos2.html

Oké bedankt allemaal!! Volgens mij kan ik nu alles afmaken. Nogmaals bedankt!

Hallo allemaal,

Ik heb bijna alles op papier staan. Het derivatiseren heb ik alleen nog niet op school gehad. Ik lees net dat het is om de vluchtigheid te verhogen en om tailing tegen te gaan. Maar hoe kies je waarmee je moet derivatiseren?

Alvast bedankt,

Hallo allemaal,

Ik heb bijna alles op papier staan. Het derivatiseren heb ik alleen nog niet op school gehad. Ik lees net dat het is om de vluchtigheid te verhogen en om tailing tegen te gaan. Maar hoe kies je waarmee je moet derivatiseren? En hoe gaat dit precies in zijn werk?

Ik heb net op internet gevonden dat je ibuprofen kan derivatiseren met trimethylsilyl. Maar hoe moet je dit precies doen?

Alvast bedankt,