Springen naar inhoud

HPLC


  • Log in om te kunnen reageren

#1

Nawara

    Nawara


  • >25 berichten
  • 80 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 10 december 2011 - 00:23

Ik heb voor de bepaling van benzoezuur in toplexil een ijkreeks gemaakt.

Deze is bereid door 118 mg natriumbenzoaat op te lossen in 100 ml om zo een concentratie te krijgen van 1 g/l benzoezuur. Om een ijkreeks te maken heb ik 0,o t/m 0,5 ml van de stockoplossing opgelost in een eluens van 50%-50% methanol- azijnzuur-acetaatbuffer (0,1 M pH 5) in een maatkolf van 25 ml. De concentratie liepen hierbij op van 0,0 mg/ml t/m 0,5 mg/ml.

Nou heb ik een monster (Toplexil) met een theoretische gehalte van 6.68 mg/ml natriumbenzoaat. Omgerekend kom ik uit op een gehalte van 5,67 mg/ml benzoezuur.

Ik weet dat ik het monster 25 keer moet verdunnen. Maar hoe doe ik dat en met wat moet ik dit doen?

Moet dit worden verdund met de eluens als bij het maken van de ijkreeks of dient deze te worden verdund met water...

En als het gemengd wordt met water, wordt de natriumbenzoaat niet omgezet in een andere stof??


Ik hoop dat iemand me zo spoedig mogelijk kan helpen.

Veranderd door Nawara, 10 december 2011 - 00:24


Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

Fuzzwood

    Fuzzwood


  • >5k berichten
  • 11101 berichten
  • Moderator

Geplaatst op 10 december 2011 - 02:42

Met een maatkolf van 250,0 ml en een pipet van 10,00 ml kom je een heel end ;)

Altijd verdunnen met eluens, anders krijg je het oplosmiddeleffect; dat je oplosmiddel ook een signaal gaat geven.

#3

Nawara

    Nawara


  • >25 berichten
  • 80 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 10 december 2011 - 08:39

Sorry, de concentraties van de ijkreeks was 0,0 t/m 0,5 mg/ 25 ml benzoezuur.

Kan er na het uitvoeren van het experiment de concentratie als volgt worden berekend?

- berekening:

Concentratie monster, bepaald aan de hand van de ijkreeks : 0,476 mg/25ml benzoezuur
0,476 /25 = 0,01904 mg/ml
Het monster is 250x verdund met de eluens (Ik weet niet of dit wel mag/kan?)
0,01904*250 = 4,76 mg/ml


-terugberekening:

concentratie monster: 5.67 mg/ml
Verdunning: 1ml monster oplossen in eluens tot 250 ml in een maatkolf

5,67 / 250 = 0,02268 mg/ml

Er zal 1 ml van deze verdunde monster worden gepipetteerd in 25 ml

Om het gelijknamig te maken met de ijkreeks: 0,02268 * 25 ml = 0,567 mg/25 ml

Kan ik op deze manier gaan extrapoleren? (aangezien het buiten de ijkreeks valt).

Veranderd door Nawara, 10 december 2011 - 09:04


#4

Nawara

    Nawara


  • >25 berichten
  • 80 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 18 december 2011 - 21:51

Maar ik moet de monster eerst 25x verdunnen (eerste stap), hiervan 1ml overbrengen in een maatkolf van 25 ml en aanvullen met de eluens om het gelijk te maken aan de ijkreeks ( concentratie= mg/ 25ml).

Nou weet ik dat de laatste stap met het eluens moet, maar moet het ook bij de verdunning (eerste stap).

Principe:het monster bevat natriumbenzoaat en aangezien er benzoezuur wordt gemeten, is de eluens samengesteld met methanol en een buffer.

Nou is mijn vraag hoe de verdunning het beste kan worden bereid? Ik hoop dat er zo snel mogelijk wordt gereageerd :S

Veranderd door Nawara, 18 december 2011 - 22:46


#5

Jurn

    Jurn


  • >250 berichten
  • 851 berichten
  • VIP

Geplaatst op 30 december 2011 - 21:05

Nou weet ik dat de laatste stap met het eluens moet, maar moet het ook bij de verdunning (eerste stap).

Zie de reactie van Fuzzwood

Altijd verdunnen met eluens, anders krijg je het oplosmiddeleffect; dat je oplosmiddel ook een signaal gaat geven.

En in principe zijn de stappen voor verdunning van een ijkreeks ook toepasbaar op je monster verdunningen.

Kan ik op deze manier gaan extrapoleren? (aangezien het buiten de ijkreeks valt).

In theorie: Als je een goede ijklijn hebt dan kan je een waarde die er buiten valt extrapoleren. Let wel op met apparatuur limieten en nauwkeurigheid.
Ik snap alleen niet helemaal waarom je wilt extrapoleren want je zegt zelf: "Concentratie monster, bepaald aan de hand van de ijkreeks : 0,476 mg/25ml benzoezuur"

Veranderd door Jurn, 30 december 2011 - 21:11

Jurn [WSF - Technicus]

It is better to be silent and be thought a fool, than to speak and remove all doubt -- Abraham Lincoln
Duct tape is like the force. It has a light side, a dark side, and it holds the universe together.... - Carl Zwanzig





0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures