Springen naar inhoud

Vitamine B12 door fermentatie


  • Log in om te kunnen reageren

#1

mverdo

    mverdo


  • 0 - 25 berichten
  • 5 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 24 februari 2012 - 17:51

Hallo

Voor mijn onderzoek maak ik gebruik van P. Denitrificans om vitamine B12 aan te maken. De bacteriŽn worden gekweekt in een medium bestaande uit: sucrose (30g/l); glutaminezuur (5,8g/l); NZ case (Kraft Inc. 10g/l); betaine (10g/l); magnesiumsulfaat (1,5g/l); diammoniumwaterstoffosfaat (3g/l); zinksulfaat (0,02g/l); ijzersulfaat (0.03g/l) natrium-molybdeentrioxide (0.005g/l); cobaltdichloride (0.12g/l); kaliumchloride (0.9g/l) en 5-6-dimethylbenzimidazole (0.045g/l).
Fermentatie gebeurt 5 dagen bij 28įC.
Vitamine B12 wordt gezuiverd door: centrifugatie, gevolgd door behandeling van het supernatans met ijsazijn en natriumnitriet (8%) en tenslotte filtratie (0.22Ķm poriŽn)
Na analyse met ELISA bekom ik steeds vrij goeie resultaten, maar wanneer ik dezelfde stalen analyseer met HPLC krijg ik telkens onmogelijke waarden na spiken.
Vermoedelijk zijn er te veel interfererende stoffen in de matrix, maar ik heb niet direct een idee hoe ik deze opspoor en/of omzeil.
Iemand een idee hoe dit misschien kan opgelost worden?

Bedankt op voorhand

Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

mardiiiii

    mardiiiii


  • 0 - 25 berichten
  • 7 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 29 februari 2012 - 13:26

heb je al geprobeerd om bij de hplc een andere drager te gebruiken?

heb je controleert hoe polair VIT B12 is en wat de Polariteit van de stationaire en de mobiele fase is?

dit heeft veel invloed op de uitslag van een hplc





0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures