L-alanine + oxoglutaraat <--ALAT--> pyruvaat + L-glutamaat
Pyruvaat + NADH + H+ <-- LD--> NAD+ + lactaat
Wanneer de NADH wordt omgezet in NAD+ veranderd dan de ph? Zo ja hoe berekent men dit dan?
Ik heb ook nog een protocol, hier in staat misschien nuttige informatie voor degene wie mij kan helpen:
Protocol ALAT
Referentiewaarden:
- Vrouwen: <31 U/l
- Mannen: <41 U/l
Benodigdheden:
- Serum (hemolyse vrij), plasma (EDTA/Heparine)
- R1:
o TRIS-buffer (pH 7.5, 100 mmol/l)
o L-Alanine (500 mmol/l)
o LDH (lactaatdehydrogenase, ≥1200 U/l
- R2:
o 2-Oxoglutarate (15 mmol/l)
o NADH (0.18 mmol/l)
Werkreagens bereiden:
- Voor Start reagent procedure: R1 en R2 zijn klaar voor gebruik
- Voor Sample Start-procedure (monoreagent): Mix R1 met R2 in verhouding 5:1.
o 1 maand houdbaar bij 2-8°C
o 5 dagen houdbaar bij 18-25°C
Werkwijze:
- Sample start procedure (monoreagent): mix 1 ml werk reagens en 100 microliter monster en incubeer 1 minuut.
- Meet de verandering in absorptie per minuut gedurende drie minuten.
- Start reagent procedure: Mix 1 ml R1 en 100 microliter monster en wacht 1 minuut.
- Voeg 200 microliter R2 toe en mix, incubeer 1 minuut bij 37°C, meet de verandering van de absorptie per minuut bij 340 nm gedurende 3 minuten.
Laatste berichten
-
20:38
Straatklok loopt 5 minuten voor 7
-
19:47
Bruine vlekken op treinaanwijzerbord 10
-
19:44
Vogels in de stad zijn goede klussers 2
-
19:12
Rood laserlicht 3
-
19:07
wig 1
-
17:30
Herleiden afmetingen vanaf een foto 21
-
16:34
[wiskunde] Prijs Product per KG; Alternatief Inzicht 3
-
13:57
do-re-mi-fa-so vliegtuigen 9
-
13:16
geen minkowski-ruimte toch? Doe ik dit nou fout? 17
-
13:12
[natuurkunde] kroon van koning op Syracuse 10
-
12:01
Gravity and gravitation 1
-
10:15
2013 – Augustus Vraag 3 3
-
24 apr
Vraag 2009 Juli Vraag 5 5
-
24 apr
positie 2
-
24 apr
Schroefdraad berekening 8
-
24 apr
[scheikunde] Kan chloorgas de geleiding van elektriciteit belemmeren? 9
-
23 apr
Weerfrustratie 9
-
23 apr
Kunnen quantum Zonnecellen 190% quantum efficiënt zijn 3
-
23 apr
De Euro Nederlandse 100 qubit computer komt eraan
-
23 apr
projectiel 8
Nieuwsberichten
-
04 mar
Een nieuw soort magnetisme: altermagnetisme
-
31 okt
AI kan via stem diabetes vaststellen 11
-
21 okt
Einstein krijgt wéér gelijk 45
-
07 feb
witter dan wit 20
-
19 jun
irrigatie en de aardas
[scheikunde] ALAT
Moderators: ArcherBarry, Fuzzwood
Re: [scheikunde] ALAT
TRIS-buffer (pH 7.5, 100 mmol/l)
Waarom zou dit in het reactiemengsel aanwezig zijn?
Waarom zou dit in het reactiemengsel aanwezig zijn?
-
- Berichten: 5
Re: [scheikunde] ALAT
Ja die buffer die vangt als het goed is de pH verandering op.. maar zou ik het ook zonder die buffer uit kunnen voeren? Want ik heb juist pH verandering nodig!
Dus als het zonder die buffer kan.. treedt er dan pH verandering op?
Dus als het zonder die buffer kan.. treedt er dan pH verandering op?
Re: [scheikunde] ALAT
Je kunt de ALAT bepaling uitvoeren zonder de buffer maar dan zal het resultaat niet meer reproduceerbaar zijn omdat de enzymactiviteit pH afhankelijk is.
Zonder de buffer zul je de pH ook niet kunnen berekenen omdat je monster(serum?) eiwitten en andere bufferende stoffen bevat.
Waarvoor heb je de pH verandering nodig?
Zonder de buffer zul je de pH ook niet kunnen berekenen omdat je monster(serum?) eiwitten en andere bufferende stoffen bevat.
Waarvoor heb je de pH verandering nodig?
-
- Berichten: 5
Re: [scheikunde] ALAT
Nouja.. ik moet een soort van point of care gaan ontwikkelen om onderandere een verhoogd of verlaagde ALAT waarde aan te tonen.. en mijn eerste gedachte ging uit naar pH verandering.. maar dat gaat dus niet werken. Heeft u toevallig nog een suggestie hoe ik dit eventueel makkelijk en snel zou kunnen aantonen?
Re: [scheikunde] ALAT
Ik denk niet dat je dit zomaar voor elkaar krijgt, voor point of care testen wil je gebruik maken van volbloed en Bij gebruik van serum of plasma heb je een centrifuge en nog wat andere spullen nodig.
Voor zover mijn kennis reikt zijn er nog geen methoden ontwikkeld om dit soort enzymmetingen in volbloed te doen.
Mijn kennis reikt inderdaad niet ver genoeg.
Even gezocht en deze link gevonden misschien dat je hier wat mee kunt.
http://www.cholestech.com/docs/test_info/tbALTAST.pdf
Voor zover mijn kennis reikt zijn er nog geen methoden ontwikkeld om dit soort enzymmetingen in volbloed te doen.
Mijn kennis reikt inderdaad niet ver genoeg.
Even gezocht en deze link gevonden misschien dat je hier wat mee kunt.
http://www.cholestech.com/docs/test_info/tbALTAST.pdf
