Springen naar inhoud

Ion Exchange Chromatography


  • Log in om te kunnen reageren

#1

Nawara

    Nawara


  • >25 berichten
  • 80 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 21 september 2012 - 09:19

Ik doe momenteel een onderzoek naar ATP met behulp van een anion exchange chromatografie.

Gezien ATP hydrolyseert en dus bij het mengen met water ADP wordt gevormd wil ik de reactie juist niet laten verlopen. Ik dacht meer aan het mengen van ATP met methanol maar weet het niet zeker. Ook moet ik twee eluensen bereiden, waarvan de 1 is en de andere fles 100 mM NaCl bevat. Ik vroeg me af bij welke UV-spectrum ik het beste kan meten en bij welke verhouding als het gaat om het gebruik van de eluensen.

Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

pimmodenhollander1

    pimmodenhollander1


  • >100 berichten
  • 244 berichten
  • Validating

Geplaatst op 23 september 2012 - 16:35

Je doet onderzoek naar ATP... Wat wil je gaan onderzoeken? Wat is het doel?

Wat bedoel je precies met je UV spectrum? Om ATP mee te meten?

Met andere woorden: wees wat duidelijker, je verhaal is nogal vaag.

#3

Nawara

    Nawara


  • >25 berichten
  • 80 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 25 september 2012 - 13:32

Mijn doel is om de polyphosphaten kwantitatief te onderzoeken en dit moet ik enkel doen met een 500 mM NaCl en demiwater. Omdat fosfaten vluchtig zijn weet ik niet hoe ik het moet analyseren :S

Het gaat om een ion exchange kolom vastgekoppeld aan een hplc-apparaat...

Veranderd door Nawara, 25 september 2012 - 13:33


#4

pimmodenhollander1

    pimmodenhollander1


  • >100 berichten
  • 244 berichten
  • Validating

Geplaatst op 25 september 2012 - 17:07

Ja oke. Polyfosfaten vluchtig? ATP lijkt me nou niet echt vluchtig, helemaal niet eigenlijk. Groot molecuul, kan heel veel waterstofbruggen aangaan. Nee...

Je zegt dat je niet weet hoe je het moet analyseren. Kan neem ik aan toch gewoon met 500 mM NaCl en demiwater, aangezien je met je elektrostatische interacties tussen analyte en kolom gaat spelen?

UV-spectrum had je het eerder over... Dan neem ik aan dat je wil gaan kijken bij welke golflengte je het best kan meten? Het zou handig zijn om ook te weten wat voor UV detector je hebt. Een 'normale' of een DAD?

#5

Nawara

    Nawara


  • >25 berichten
  • 80 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 26 september 2012 - 07:35

De UV is 259 nm.

Maar waar ik mee zit is dat ik bij iedere bron aan informatie over de ionwisselingschromatografie het gebruik van een buffer weer terugvind. Terwijl ik dus juist geen buffer mag gebruiken.

En als je geen buffer gebruikt dan zal de stof niet ioniseren en kan ik de component niet analyseren, toch?

#6

Marko

    Marko


  • >5k berichten
  • 8935 berichten
  • VIP

Geplaatst op 26 september 2012 - 15:35

Wees asjeblieft een beetje zorgvuldig met je termen. "De UV is...", "bij welk spectrum",

Je vraagt je kennelijk af bij welke golflengte je het beste kunt meten. Ik zou zeggen, zoek eens op hoe het UV-spectrum van ATP eruitziet. Zoeken op "UV ATP" levert talloze hits, de eerste naar een artikel dat een hele schat aan informatie zou kunnen geven. Dan kun je ook controleren of die 259 nm inderdaad juist is.

Vraag jezelf eens af wat de rol van buffer is, met betrekking tot de stoffen die normaal gesproken geanalyseerd worden, en het feit dat je geladen deeltjes nodig hebt.
Vraag je ook eens af onder welke omstandigheden ATP geladen is.

Verder: Enzymatisch verloopt de hydrolyse van ATP erg snel, gelukkig maar. Maar zonder enzymen, niet gekatalyseerd dus, is de snelheidsconstante in neutraal milieu in de orde 10-9 s-1, wat overeenkomt met een halfwaardetijd van tientallen jaren.

Cetero censeo Senseo non esse bibendum






0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures