HPLC standaardreeks concentratie
Geplaatst: za 22 sep 2012, 03:20
ik heb biogene amines moeten analyseren via HPLC en heb 2 vragen.
*ik heb een standaard mix die bestaan uit :
Standaard
Gewicht (g)
β-fenylethylamine hydrochloride 0,035
histamine dihydrochloride
0,040
cadaverine dihydrochloride
0,045
putrescine dihydrochloride
0,045
tryptamine hydrochloride
0,030
tyramine hydrochloride
0,030
serotonine hydrochloride
0,030
spermine
0,025
spermidine
0,025
standaard mix in een kolf van 25 ml en 25 ml aangezuurde methanol toegevoegd
*als inwendige standaard: 0,050 g 1,7-diaminoheptaan in een kolf van 50 ml en aangelengd met aangezuurde methanol
*standaardreeks:
-std 1: 0 µl STMIX/10 + 200 µl IS => 0 ppm
-std 2: 40 µl STMIX/10 + 200 µl IS => 2ppm
-std 3: 100 µl STMIX/10 + 200 µl IS => 5
-std 4 : 500 µl STMIX/10 + 200 µl IS => 25
-std 5 : 100 µl STMIX + 200 µl IS => 50
-std 6: 200 µl STMIX + 200 µl IS => 100
-std 7: 400 µl STMIX + 200 µl IS => 200
*staal: 2 g vlees + 200 µl IS -> extractie ->derivatisatie -> zuivering en concentreren
vragen:
1) waarom telkens IS toevoegen aan staal en standaardreeks? is het voor de bepaling van de hoeveelheid biogene amines in staal door lineaire regressie
2) hoe wordt de concentratie van standaardreeks berekend?
bijvoorbeeld std 5 is 50 ppm, maar ik weet niet hoe men eraan komt
*ik heb een standaard mix die bestaan uit :
Standaard
Gewicht (g)
β-fenylethylamine hydrochloride 0,035
histamine dihydrochloride
0,040
cadaverine dihydrochloride
0,045
putrescine dihydrochloride
0,045
tryptamine hydrochloride
0,030
tyramine hydrochloride
0,030
serotonine hydrochloride
0,030
spermine
0,025
spermidine
0,025
standaard mix in een kolf van 25 ml en 25 ml aangezuurde methanol toegevoegd
*als inwendige standaard: 0,050 g 1,7-diaminoheptaan in een kolf van 50 ml en aangelengd met aangezuurde methanol
*standaardreeks:
-std 1: 0 µl STMIX/10 + 200 µl IS => 0 ppm
-std 2: 40 µl STMIX/10 + 200 µl IS => 2ppm
-std 3: 100 µl STMIX/10 + 200 µl IS => 5
-std 4 : 500 µl STMIX/10 + 200 µl IS => 25
-std 5 : 100 µl STMIX + 200 µl IS => 50
-std 6: 200 µl STMIX + 200 µl IS => 100
-std 7: 400 µl STMIX + 200 µl IS => 200
*staal: 2 g vlees + 200 µl IS -> extractie ->derivatisatie -> zuivering en concentreren
vragen:
1) waarom telkens IS toevoegen aan staal en standaardreeks? is het voor de bepaling van de hoeveelheid biogene amines in staal door lineaire regressie
2) hoe wordt de concentratie van standaardreeks berekend?
bijvoorbeeld std 5 is 50 ppm, maar ik weet niet hoe men eraan komt