he,
voor een verslag van biotechnologie moet ik het hebben over de Qiagen-procedure. Nu vroeg ik me af waarvoor precies de buffers voor dienen. Ik weet dat er een bijzit voor de PH te verhogen en een om de PH te verlagen maar de rest ben ik vergeten.
kan iemand mij helpen?
alvast bedankt !
Laatste berichten
-
22:08
wig 11
-
21:37
speciale rel. theorie 12
-
21:22
[scheikunde] vraag Chemie - wat is de oplossing? 11
-
20:14
Aardlek-schakelaar 2
-
15:56
Programmeren met vectoren 6
-
14:53
Straatklok loopt 5 minuten voor 12
-
25 apr
Gravity and gravitation 4
-
25 apr
Bruine vlekken op treinaanwijzerbord 10
-
25 apr
Vogels in de stad zijn goede klussers 2
-
25 apr
Rood laserlicht 3
-
25 apr
Herleiden afmetingen vanaf een foto 21
-
25 apr
[wiskunde] Prijs Product per KG; Alternatief Inzicht 3
-
25 apr
do-re-mi-fa-so vliegtuigen 9
-
25 apr
geen minkowski-ruimte toch? Doe ik dit nou fout? 17
-
25 apr
[natuurkunde] kroon van koning op Syracuse 10
-
25 apr
2013 – Augustus Vraag 3 3
-
24 apr
Vraag 2009 Juli Vraag 5 5
-
24 apr
positie 2
-
24 apr
Schroefdraad berekening 8
-
24 apr
[scheikunde] Kan chloorgas de geleiding van elektriciteit belemmeren? 9
Nieuwsberichten
-
04 mar
Een nieuw soort magnetisme: altermagnetisme
-
31 okt
AI kan via stem diabetes vaststellen 11
-
21 okt
Einstein krijgt wéér gelijk 45
-
07 feb
witter dan wit 20
-
19 jun
irrigatie en de aardas
buffers van de Qiagen-procedure
Moderator: ArcherBarry
-
- Berichten: 773
Re: buffers van de Qiagen-procedure
Ik weet niet precies wat je bedoelt met "de qiagen procedure" want qiagen heeft erg veel kits die allemaal werken met kolommen en buffers. Uiteraard verschilt het dus een beetje per kit, en ook per buffer. Je hebt bijvoorbeeld in de meeste kits wel een eqilibratie buffer, wasbuffers, elutiebuffers (daarbij gaat het ook om ethanol- en water gehaltes, zeker niet alleen pH) maar in veel kits heb je ook nog lysis buffers om maar iets te noemen.
Als je niet begrijpt waar de buffers voor zijn begrijp je de hele procedure niet dus als je een verslag moet maken is het vast verstandig om er zelf nog even in te duiken.
Anders moet je iets duidelijker zijn in wat je precies wilt weten, dit klinkt nu een klein beetje als: "Doe de opdracht even voor me"
Als je niet begrijpt waar de buffers voor zijn begrijp je de hele procedure niet dus als je een verslag moet maken is het vast verstandig om er zelf nog even in te duiken.
Anders moet je iets duidelijker zijn in wat je precies wilt weten, dit klinkt nu een klein beetje als: "Doe de opdracht even voor me"
To boldly go where I`ve never been before
Be nice to nerds, chances are you`ll end up working for one
Be nice to nerds, chances are you`ll end up working for one
-
- Berichten: 9
Re: buffers van de Qiagen-procedure
waarvoor dient de P1 buffer ? (er sta bij resuspensie maar wat betekend dit nu juist )
alle buffers die ik gebruik zijn
P1
P2
N3
PB
PE
dank je !
alle buffers die ik gebruik zijn
P1
P2
N3
PB
PE
dank je !
-
- Berichten: 320
Re: buffers van de Qiagen-procedure
Kan je ons misschien de volledige naam van de Kit geven en waarvoor je het precies gebruikt?
Resuspensie buffer dient normaal om cellpellet her op te lossen (na centrifugatie bijvoorbeeld).
Resuspensie buffer dient normaal om cellpellet her op te lossen (na centrifugatie bijvoorbeeld).
-
- Berichten: 9
Re: buffers van de Qiagen-procedure
die ken ik zelf niet ik weet enkel welke buffers ik moest gebruiken en in welke volgorde.Sjitty schreef: ↑za 03 nov 2012, 23:46
Kan je ons misschien de volledige naam van de Kit geven en waarvoor je het precies gebruikt?
Resuspensie buffer dient normaal om cellpellet her op te lossen (na centrifugatie bijvoorbeeld).
-
- Berichten: 320
Re: buffers van de Qiagen-procedure
Was het een kit voor DNA opzuivering uit cellen?
Wat was je start materiaal en wat ben je bekomen?
Wat was je start materiaal en wat ben je bekomen?
-
- Berichten: 9
Re: buffers van de Qiagen-procedure
we zijn gestart met E. ColiSjitty schreef: ↑ma 05 nov 2012, 23:22
Was het een kit voor DNA opzuivering uit cellen?
Wat was je start materiaal en wat ben je bekomen?
sorry voor het late antwoord, ik zat zonder internet
-
- Berichten: 3.963
Re: buffers van de Qiagen-procedure
Opmerking moderator
@redflower0kirsten: Op deze manier komen we nergens.
Zonder een exacte beschrijving van je experiment is het voor een buitenstaander onmogelijk hier ook maar iets zinnigs over te zeggen. Qiagen is een internationaal bedrijf met duizenden procedures waarvoor duizenden verschillende buffers worden gebruikt.
Beschrijf a.u.b. je experiment, met alle details, waarschijnlijk kan dan iemand je helpen.
Zonder een exacte beschrijving van je experiment is het voor een buitenstaander onmogelijk hier ook maar iets zinnigs over te zeggen. Qiagen is een internationaal bedrijf met duizenden procedures waarvoor duizenden verschillende buffers worden gebruikt.
Beschrijf a.u.b. je experiment, met alle details, waarschijnlijk kan dan iemand je helpen.
"Success is the ability to go from one failure to another with no loss of enthusiasm" - Winston Churchill
-
- Berichten: 320
Re: buffers van de Qiagen-procedure
Ik vermoed dat het de bedoeling was om( plasmide) DNA te zuiveren uit E. Coli met een van de DNA prep kits. Meestal begin je met het opgroeien van je cultuur (hier E. Coli) waarrna het medium als supernatans verwijderd wordt via centrifugatie. De overblijvende pellet wordt dan eers heropgelost in resuspensiebufffer (P1), gelyseerd met lysebuffer (P2), geneutraliseerd met neutralisattiebuffer (N3) debris verwijderd met door centrifugatie, supernatans op 'een filterkolom gebracht, gewassen met wasbuffer (PB, B voor binding omdat deze bufer nog ethanol bevat zodat DNA op de filter gebonden blijft), en vervolgens geëlueerd met nucleasefree water (NE, E voor elutie) zonder ethanol, zodat het DNA nu opgevangen wordt in het epje.
Hopelijke herinner je je deprocedure een beetje zodat je zelf weet of dit de juiste is. De procedure kan veschillen naar gelang de hoeveelheid cultuur/DNA je wil gebruiken/bekomen (minPrep,midiPrep,megaPrep,gigaPrep).
Hopelijke herinner je je deprocedure een beetje zodat je zelf weet of dit de juiste is. De procedure kan veschillen naar gelang de hoeveelheid cultuur/DNA je wil gebruiken/bekomen (minPrep,midiPrep,megaPrep,gigaPrep).
-
- Berichten: 9
Re: buffers van de Qiagen-procedure
oke dank je hier ben ik al veel meeSjitty schreef: ↑za 10 nov 2012, 11:48
Ik vermoed dat het de bedoeling was om( plasmide) DNA te zuiveren uit E. Coli met een van de DNA prep kits. Meestal begin je met het opgroeien van je cultuur (hier E. Coli) waarrna het medium als supernatans verwijderd wordt via centrifugatie. De overblijvende pellet wordt dan eers heropgelost in resuspensiebufffer (P1), gelyseerd met lysebuffer (P2), geneutraliseerd met neutralisattiebuffer (N3) debris verwijderd met door centrifugatie, supernatans op 'een filterkolom gebracht, gewassen met wasbuffer (PB, B voor binding omdat deze bufer nog ethanol bevat zodat DNA op de filter gebonden blijft), en vervolgens geëlueerd met nucleasefree water (NE, E voor elutie) zonder ethanol, zodat het DNA nu opgevangen wordt in het epje.
Hopelijke herinner je je deprocedure een beetje zodat je zelf weet of dit de juiste is. De procedure kan veschillen naar gelang de hoeveelheid cultuur/DNA je wil gebruiken/bekomen (minPrep,midiPrep,megaPrep,gigaPrep).
