[biologie] Cytochroom C concentraties
Moderators: ArcherBarry, Fuzzwood
-
- Berichten: 4
Cytochroom C concentraties
Voor een practicum biochemie moet ik de concentratie cytochroom c uit runderhart bepalen met behulp van uv spectrofotometrie.
Aan verschillende monsters uit zuiveringsstappen wordt natriumdithioniet toegevoegd zodat het cytochroom c reduceert. Er wordt ook een standaard van 10mg/ml meegenomen. De concentratie wordt berekend met de lambert beer formule (E=Ԑ*c*l).
Nu mijn probleem: De concentratie die hier uit komt is in mol per liter, Ik moet echter de concentratie berekenen in mg/ml (gram per liter) Ik moet dus het aantal mol omrekenen naar gram. Cytochroom c heeft een molmassa van ongeveer 12000 g/mol en een molaire extinctie coefficient van 29,5 mM-1.cm-1
Een voorbeeld: de standaard cytochroom c oplossing van 10 g/l heeft een absorptie van 1,9626 bij 550nm. De concentratie zou dan zijn: c=E/ Ԑ*l >> c=1,9626 / 29,5 * 1 = 0,0665 mol/l
0,0665 mol * 12000 = 798 gram in 1 liter
Dit klopt totaal niet met de bekende concentratie van 10 g /L
Kan iemand mij uitleggen wat ik hier verkeerd doe?
Bij voorbaat dank.
Aan verschillende monsters uit zuiveringsstappen wordt natriumdithioniet toegevoegd zodat het cytochroom c reduceert. Er wordt ook een standaard van 10mg/ml meegenomen. De concentratie wordt berekend met de lambert beer formule (E=Ԑ*c*l).
Nu mijn probleem: De concentratie die hier uit komt is in mol per liter, Ik moet echter de concentratie berekenen in mg/ml (gram per liter) Ik moet dus het aantal mol omrekenen naar gram. Cytochroom c heeft een molmassa van ongeveer 12000 g/mol en een molaire extinctie coefficient van 29,5 mM-1.cm-1
Een voorbeeld: de standaard cytochroom c oplossing van 10 g/l heeft een absorptie van 1,9626 bij 550nm. De concentratie zou dan zijn: c=E/ Ԑ*l >> c=1,9626 / 29,5 * 1 = 0,0665 mol/l
0,0665 mol * 12000 = 798 gram in 1 liter
Dit klopt totaal niet met de bekende concentratie van 10 g /L
Kan iemand mij uitleggen wat ik hier verkeerd doe?
Bij voorbaat dank.
-
- Berichten: 4
Re: Cytochroom C concentraties
dom dat ik dat over het hoofd heb gezien..
In ieder geval bedankt voor het snelle antwoord.
Ik kom nu uit op 7,79 g/L wat nog steeds niet overeenkomt met 10 g/L maar dit zal wel komen omdat de standaard cytochroom c oplossing die gebruikt is tientallen jaren oud is.
In ieder geval bedankt voor het snelle antwoord.
Ik kom nu uit op 7,79 g/L wat nog steeds niet overeenkomt met 10 g/L maar dit zal wel komen omdat de standaard cytochroom c oplossing die gebruikt is tientallen jaren oud is.
- Berichten: 154
Re: Cytochroom C concentraties
Kun je je berekening eens laten zien.
Ik kom zo snel even uit op 0.779 g/l
het kan ook zijn dat ik ergens een foutje maak
Ik kom zo snel even uit op 0.779 g/l
het kan ook zijn dat ik ergens een foutje maak