Sorry voor de lange omschrijving van mijn probleem, maar ik kreeg het niet korter
Ik loop bij mijn afstudeeropdracht tegen het volgende probleem aan, aangezien mijn begeleider geen diepgaande HPLC kennis heeft, probeer ik het hier.Mijn probleem
Ik ben bezig met onderzoek naar de degradatie van Bronopol m.b.v. RP-HPLC (DAD). Ik weet dat bronopol uiteenvalt in verschillende componenten. Het wordt in mijn onderzoek echter voor het grootste gedeelte omgezet in 2-broom-2-nitroethanol(BNE). Daarom wil ik dit component juist kunnen kwantificeren. Hier is echter geen standaard voor verkrijgbaar, en deze zelf bereiden uit bronopol (volgens literatuurreferentie) is mij ook niet gelukt.
Mijn voorkeur ging daarom uit naar % totale piekoppervlakte. Bij al mijn monsters is de begin concentratie van bronopol (wat degradeert naar BNE) hetzelfde. Echter door eerdere toevoeging van verschillende andere stoffen (drie pieken) in mijn onderzoek wordt het percentage van de totale piekoppervlakte wel beïnvloed. Daardoor wordt het % totale piekoppervlakte van 2-broom-2-nitroethanol beinvloed door toevoeging van deze andere componenten. Hierdoor kan ik geen hoeveelheid koppelen dit percentage van het totale piekoppervlakte
Graag wil ik de concentratie hiervan toch bepalen en het ook nog is correct verantwoord in mijn eindverslag hebben staan. Ik heb twee oplossingen bedacht, maar weet niet of deze goed genoeg zijn voor in mijn eindverslag. Graag hoor ik jullie mening hierover of een mogelijk andere oplossing voor mijn probleem.
Oplossing 1
De area's van de drie pieken niet betrekken bij het totale % piekoppervlakte. Oftewel de area's van componenten die ik heb toegevoegd van het totale piekoppervlake aftrekken en deze overgebleven piekoppervlakte vervolgens gebruiken als totale piekoppervlakte
Oplossing 2 (deze is wat vergezocht, maar dit is de enige oplossing die ik weet als de eerste niet kan)
Het bepalen van de relatieve retentie factor tussen bronopol en 2-broom-2-nitroethanol en van daaruit de concentratie berekenen van 2-broom-2-nitroethanol aan de hand van een bronopolstandaard. Door het volgende te doen, zie toegevoegde afbeelding:
- BNP BNP degr.JPG (87.81 KiB) 556 keer bekeken
Ik had een bronopoloplossing bereid, stel deze was 100mol/l.
Bovenste plaatje= deze oplossing direct geanalyseerd.
Onderste plaatje= deze oplossing geanalyseerd na geforceerde degradatie door pH verhoging.
In het onderste plaatje kan ik zowel bronopol als BNM kwantificeren m.b.v. een kalibratie. Stel dat ik dus 30mol/l voor bronopol vind en 2 mol/l voor BNM. Kan ik dan de ontbrekende mol BNP toekennen aan BNE (Als ik de aanname maak dat alle componenten die kunnen ontstaan ook worden gedetecteerd).
Als ik dan mijn bronopol oplossing bij verschillende concentraties verdun en ik doe hetzelfde voor mijn geforceerde degradatie oplossing. Deze analyseer ik vervolgens. Dan kan ik in theorie bij verschillende area's verschillende concentraties van BNE toekennen. Hieruit kan ik de gevoeligheid of respons factor berekenen van BNE. Door deze te vergelijken met de respons factor van bronopol, kan ik in ieder geval een schatting maken naar de concentratie van 2-broom-2-nitroethanol(BNE).
Nu vraag ik mij dus af of ik dit zo kan doen, mits ik de aanname maak dat ik alle componenten die kunnen ontstaan ook daadwerkelijk detecteer. Ik denk allemaal dat dit dus tever gezocht is en dit niet gaat, graag hoor ik wat jullie hier over denken.
