Springen naar inhoud

Elutiebuffer verwarmen


  • Log in om te kunnen reageren

#1

Esolie

    Esolie


  • 0 - 25 berichten
  • 3 berichten
  • Gebruiker

Geplaatst op 28 oktober 2014 - 11:00

Bij DNA-isolatie uit bloed gebruiken wij een elutiebuffer om het DNA los te laten van de kolom.

Weet iemand waarom de elutiebuffer verwarmd moet worden bij 56 oC?


Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

Kravitz

    Kravitz


  • >1k berichten
  • 4042 berichten
  • Moderator

Geplaatst op 29 oktober 2014 - 00:23

Kan je iets meer uitleg geven over de setting van je experiment?

 

Wat voor kolom gebruik je? Welke elutiebuffer? Wat zit er precies in?

 

Het enige dat ik zo onmiddellijk (en zonder informatie) kan bedenken is om neerslag te voorkomen.

"Success is the ability to go from one failure to another with no loss of enthusiasm" - Winston Churchill

#3

Esolie

    Esolie


  • 0 - 25 berichten
  • 3 berichten
  • Gebruiker

Geplaatst op 03 november 2014 - 11:18

Wij gebruiken de Invisorb Spin Blood Mini Kit , Stratec, Isogen Life Science

De elutiebuffer is een waterige buffer oplossing. Wat er in de kolommen zit daar kom ik helaas niet achter. In de bijsluiter staat alleen mar dat verwarmen nodig is, maar niet waarom.


#4

Kravitz

    Kravitz


  • >1k berichten
  • 4042 berichten
  • Moderator

Geplaatst op 03 november 2014 - 14:37

Eerlijk gezegd weet ik het ook niet, maar een paar hypotheses zijn:

 

  • Proteinase K (uit de lysebuffer) werkt beter tussen de 50-60°C. De temperatuur verhogen (ook bij de elutie) kan er dus voor zorgen dat proteinase K langer kan werken en dat je zuivering beter verloopt.
  • De verhoogde temperatuur zorgt ervoor dat eiwitten denatureren en op de filter blijven liggen. Dit in combinatie met de aanwezigheid van proteinase K zou de zuivering ook kunnen bevorderen.
"Success is the ability to go from one failure to another with no loss of enthusiasm" - Winston Churchill

#5

Esolie

    Esolie


  • 0 - 25 berichten
  • 3 berichten
  • Gebruiker

Geplaatst op 03 november 2014 - 14:39

Heel erg bedankt voor je antwoord!






0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures