Elutiebuffer verwarmen
Moderator: ArcherBarry
Forumregels
(Middelbare) school-achtige vragen naar het forum "Huiswerk en Practica" a.u.b.
Zie eerst de Huiswerkbijsluiter
(Middelbare) school-achtige vragen naar het forum "Huiswerk en Practica" a.u.b.
Zie eerst de Huiswerkbijsluiter
-
- Berichten: 3
Elutiebuffer verwarmen
Bij DNA-isolatie uit bloed gebruiken wij een elutiebuffer om het DNA los te laten van de kolom.
Weet iemand waarom de elutiebuffer verwarmd moet worden bij 56 oC?
Weet iemand waarom de elutiebuffer verwarmd moet worden bij 56 oC?
- Berichten: 3.963
Re: Elutiebuffer verwarmen
Kan je iets meer uitleg geven over de setting van je experiment?
Wat voor kolom gebruik je? Welke elutiebuffer? Wat zit er precies in?
Het enige dat ik zo onmiddellijk (en zonder informatie) kan bedenken is om neerslag te voorkomen.
Wat voor kolom gebruik je? Welke elutiebuffer? Wat zit er precies in?
Het enige dat ik zo onmiddellijk (en zonder informatie) kan bedenken is om neerslag te voorkomen.
"Success is the ability to go from one failure to another with no loss of enthusiasm" - Winston Churchill
-
- Berichten: 3
Re: Elutiebuffer verwarmen
Wij gebruiken de Invisorb Spin Blood Mini Kit , Stratec, Isogen Life Science
De elutiebuffer is een waterige buffer oplossing. Wat er in de kolommen zit daar kom ik helaas niet achter. In de bijsluiter staat alleen mar dat verwarmen nodig is, maar niet waarom.
De elutiebuffer is een waterige buffer oplossing. Wat er in de kolommen zit daar kom ik helaas niet achter. In de bijsluiter staat alleen mar dat verwarmen nodig is, maar niet waarom.
- Berichten: 3.963
Re: Elutiebuffer verwarmen
Eerlijk gezegd weet ik het ook niet, maar een paar hypotheses zijn:
- Proteinase K (uit de lysebuffer) werkt beter tussen de 50-60°C. De temperatuur verhogen (ook bij de elutie) kan er dus voor zorgen dat proteinase K langer kan werken en dat je zuivering beter verloopt.
- De verhoogde temperatuur zorgt ervoor dat eiwitten denatureren en op de filter blijven liggen. Dit in combinatie met de aanwezigheid van proteinase K zou de zuivering ook kunnen bevorderen.
"Success is the ability to go from one failure to another with no loss of enthusiasm" - Winston Churchill